Anticuerpo policlonal rabbit de Phospho-EZH2/KMT6 (T311) para WB y ELISA - Q15910

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de EZH2

• EZH2 es una histona-lisina N-metiltransferasa, también conocida como potenciador del homologo 2 de zeste, ENX-1 o KMT6, y funciona como subunidad catalítica del complejo PRC2.
• El complejo PRC2/EED-EZH2 metila la histona H3 en las posiciones Lys-9 y Lys-27, lo que provoca la represión transcripcional de los genes diana. Referencias relacionadas: PMID:14532106, PMID:15225548, PMID:15385962
• EZH2 realiza mono-, di- y trimetilación de H3K27, con preferencia por sustrato no metilado (H3K27me0) y una actividad progresivamente menor sobre H3K27me1 y H3K27me2. Referencias relacionadas: PMID:15231737, PMID:17210787, PMID:18285464, PMID:22323599, PMID:30923826
• En las células madre embrionarias, EZH2 es más abundante que EZH1 y es esencial para establecer las marcas H3K27me3 necesarias para la identidad de la célula madre y una diferenciación adecuada. Referencias relacionadas: PMID:19026781
• El complejo PRC2 puede reclutar ADN metiltransferasas, vinculando la metilación de histonas con la metilación del ADN y reforzando el silenciamiento genético. Referencias relacionadas: PMID:16357870, PMID:17200670
• Los genes diana conocidos reprimidos por EZH2/PRC2 incluyen HOXC8, HOXA9, MYT1, CDKN2A y genes sensibles al ácido retinoico. Referencias relacionadas: PMID:16179254, PMID:18086877, PMID:20935635
• EZH2 también metila proteínas no histonas como el factor de transcripción GATA4 y el receptor nuclear RORA, ampliando su alcance regulador. Referencias relacionadas: PMID:23063525
• Regula los ritmos circadianos al metilar la histona H3 en los promotores de los genes reloj, facilitando la represión mediada por CRY1/2 de la transcripción de PER1/2.
• EZH2 se localiza predominantemente en el núcleo y se expresa ampliamente en muchos tejidos; se observa con frecuencia sobreexpresión en cánceres de mama, colon, laringe, linfoma y testículo. Referencias relacionadas: PMID:14532106
• EZH2 es una fosfoproteína, y la fosforilación en el residuo Thr311 es una de las modificaciones postraduccionales que puede regular su actividad.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno utilizado para generar este anticuerpo es un péptido sintético que lleva fosforilación en Thr311; por lo tanto, se espera que el anticuerpo reconozca específicamente la forma fosforilada de EZH2 en este sitio. Confirme la especificidad comparando las señales en muestras tratadas con fosfatasa y muestras sin tratar.
• Para la transferencia occidental (WB), EZH2 migra a ~85 kDa. Utilice controles positivos adecuados como las células HEK293T o HeLa, y valide la detección de la forma fosfo-T311 en condiciones que induzcan la fosforilación de EZH2.
• Se puede emplear ELISA para el análisis cuantitativo de los niveles de phospho-EZH2 (T311); considere utilizar un anticuerpo de captura combinado con este pAb para la técnica de ELISA sándwich.
• Se ha observado reactividad cruzada con rata; por lo tanto, este anticuerpo puede ser adecuado para estudios en modelos de roedores. Valídelo en el sistema de tejido o línea celular correspondiente para garantizar la especificidad.

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