pAb de conejo para Phospho-Filamin A-S2152 para WB, ELISA - P21333

Especificaciones y parámetros principales del producto

Información biológica: Función y localización de la Filamina-A

• La Filamina-A (FLNA) es una proteína principal de unión a actina que entrecruza filamentos de actina formando redes ortogonales y las une a glicoproteínas de membrana, funcionando como andamio para una amplia gama de proteínas de señalización citoplasmática.
• Se localiza en la corteza celular, el citoesqueleto, el pericarion y proyecciones celulares especializadas como los conos de crecimiento y los podosomas, donde organiza el citoesqueleto de actina.
• La Filamina-A es esencial para la adhesión celular, los contactos intercelulares y la dinámica de las uniones adherentes durante el desarrollo de vasos sanguíneos, corazón y cerebro.
• Es necesaria para el colapso del cono de crecimiento inducido por SEMA3A durante la guía de axones, conectando la señalización de las semaforinas con la remodelación de la actina. Referencias relacionadas: PMID:25358863
• La Filamina-A se expresa de forma ubicua y tiene un peso molecular de ~281 kDa; surgen múltiples isoformas a partir del empalme alternativo, aunque este producto está dirigido a un sitio de fosforilación conservado en la secuencia canónica.
• La proteína está sujeta a múltiples modificaciones postraduccionales que incluyen fosforilación, acetilación, formación de enlaces isopéptidos y conjugación con ubiquitina; la fosforilación en S2152 es un evento regulado dinámicamente.
• Las mutaciones en FLNA están asociadas a un espectro de enfermedades humanas, que incluyen la heterotopia nodular periventricular, los síndromes otopalatodigitales y la displasia valvular cardíaca.

Guía experimental y consejos técnicos

• Debido a que el inmunógeno es un fosfopéptido sintético alrededor de S2152, incluye inhibidores de fosfatasas durante la preparación de muestras para preservar el estado de fosforilación para la transferencia Western.
• Verifica la especificidad del anticuerpo mediante competición con el péptido no fosforilado o tratando las muestras con fosfatasa lambda; una pérdida de señal confirma la especificidad por la forma fosforilada.
• El gran tamaño de la Filamina-A (281 kDa) puede requerir geles de SDS-PAGE de bajo porcentaje (por ejemplo, 6%) y tiempos de transferencia prolongados; considera una transferencia húmeda a 30 V durante toda la noche.
• Para ELISA, considera combinar este anticuerpo específico para la forma fosforilada con un anticuerpo contra Filamina-A total para permitir la medición de la relación fosforilada/total.
• Se informa reactividad cruzada para humano, ratón y rata; valida en tu tejido o sistema celular específico si trabajas con otras especies.

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