Anticuerpo Policlonal de Conejo Phospho-FOXO3A-S425 para WB, IHC-P, ELISA - O43524

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Proteína Forkhead box O3

• La proteína Forkhead box O3 (FOXO3A), también conocida como proteína AF6q21 o Forkhead en rabdomiosarcoma-like 1 (FKHRL1), es un factor de transcripción expresado ubicuamente codificado por el gen FOXO3 (ID de gen humano 2309).
• FOXO3A actúa como un activador transcripcional que reconoce el consenso de ADN 5'-[AG]TAAA[TC]A-3', regulando procesos clave como la apoptosis y la autofagia. Referencias relacionadas: PMID:10102273, PMID:16751106, PMID:21329882
• En respuesta a la privación de nutrientes, FOXO3A entra en el núcleo tras la desfosforilación y aumenta la expresión de genes de autofagia (p. ej., GABARAP1L, MAP1LC3B, ATG12), promoviendo la degradación de proteínas del músculo esquelético.
• FOXO3A desencadena la apoptosis en ausencia de factores de supervivencia, causando notablemente la muerte celular neuronal bajo estrés oxidativo. Referencias relacionadas: PMID:10102273, PMID:16751106
• Tras la fosforilación por MAPKAPK5, FOXO3A induce miR-34b y miR-34c, que suprimen postranscripcionalmente la expresión del oncogén MYC. Referencias relacionadas: PMID:21329882
• FOXO3A se desplaza entre el citoplasma y el núcleo, y bajo estrés metabólico se transloca a la matriz mitocondrial y la membrana externa para mejorar la transcripción del ADNmt. Referencias relacionadas: PMID:23283301
• Las modificaciones postraduccionales clave incluyen la fosforilación (p. ej., en Ser425), acetilación, metilación y ubiquitinación, que rigen su actividad, localización y estabilidad.
• FOXO3A participa en la diferenciación de células T reguladoras al activar la expresión de FOXP3, y en el compromiso condrogénico de progenitores esqueléticos bajo condiciones de lípidos bajos. Referencias relacionadas: PMID:30513302

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético fosforilado que rodea la serina 425; para preservar esta modificación lábil, añada inhibidores de fosfatasas durante la preparación de la muestra.
• Para Western blot (WB), considere cargar un control positivo como el lisado de células tratadas con un inductor de la fosforilación de FOXO3A (p. ej., estrés oxidativo o privación de suero) y valide la especificidad de la banda con una muestra tratada con fosfatasa.
• La inmunohistoquímica (IHC-P) puede requerir optimización de la recuperación de antígenos; incluya un paso de bloqueo con consideraciones específicas para fosfo para reducir la unión inespecífica.
• Los protocolos ELISA deben utilizar las condiciones de recubrimiento recomendadas e incluir una curva estándar; la reactividad cruzada entre humano, ratón y rata sugiere que el epítopo está conservado, pero confirme siempre el rendimiento en su matriz de interés.
• El peso proteico es de aproximadamente 71 kDa; verifique la detección en el tamaño esperado y tenga en cuenta un posible desplazamiento debido a modificaciones postraduccionales.

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