Anticuerpo policlonal de conejo contra Phospho-FOXO4-S197 para WB, IF/ICC, ELISA - P98177

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de FOXO4

• La proteína de caja forkhead O4 (FOXO4), también conocida como AFX, AFX1 o MLLT7, es un factor de transcripción de la familia forkhead.
• FOXO4 se une a los elementos de respuesta a insulina (IRE) y regula la vía de señalización de insulina al activar la transcripción de blancos como IGFBP1.
• Funciona como regulador negativo del ciclo celular y participa en los procesos de diferenciación celular y desarrollo.
• FOXO4 disminuye la expresión de HIF1A y suprime la activación transcripcional inducida por hipoxia, lo que lo relaciona con las vías de detección de oxígeno.
• En células madre embrionarias, FOXO4 aumenta la actividad del proteasoma al regular al alza PSMD11, promoviendo el ensamblaje del proteasoma 26S.
• La proteína se localiza tanto en el citoplasma como en el núcleo, y el transporte nucleocitoplasmático está regulado por fosforilación.
• FOXO4 se expresa ampliamente, con niveles más altos en corazón, cerebro, placenta, pulmón, hígado, músculo esquelético, riñón y páncreas; la isoforma zeta predomina en hígado, riñón y páncreas.
• Las modificaciones postraduccionales clave incluyen la fosforilación (por ejemplo, en Ser197), acetilación y ubiquitinación, que modulan su actividad y estabilidad.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un fosfopéptido sintético que incluye la Ser197; para la detección específica de fosforilación, considere tratar las muestras con lambda fosfatasa para confirmar la especificidad de la señal.
• Para Western blot, se espera una banda alrededor de 54 kDa; verifíquela en lisados de tejidos con expresión conocida de FOXO4 como hígado o riñón.
• En inmunofluorescencia/ICC, monitoree el transporte nucleocitoplasmático bajo diferentes estímulos; la estimulación con insulina o factores de crecimiento puede alterar la localización.
• Al usar ELISA, recubra con el fosfopéptido y compárelo con el péptido no fosforilado para evaluar la selectividad de fosforilación del anticuerpo.
• Se ha reportado reactividad cruzada con FOXO4 endógeno de ratón y rata; valide el anticuerpo en el contexto de especie y tejido correspondiente.

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