Anticuerpo policlonal de conejo Phospho-GAB1 (Tyr659) para WB y ELISA - Q13480

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la proteína GRB2-associated-binding protein 1

• GAB1 (GRB2-associated-binding protein 1) es una proteína adaptadora de andamiaje que media la señalización aguas abajo de múltiples receptores tirosina quinasa.
• Participa en cascadas de señalización intracelular activadas por receptores como FGFR1, EGFR e INSR.
• Está involucrado específicamente en la vía de señalización MET/HGF. Referencias relacionadas: PMID:29408807
• Es un miembro de la familia de proteínas adaptadoras GAB, comparte motivos estructurales como un dominio de homología a pleckstrina y múltiples sitios de fosforilación de tirosina que reclutan proteínas que contienen dominios SH2.
• Se fosforila intensamente en residuos de tirosina (incluido Y659) después de la activación del receptor, lo que es fundamental para su interacción con efectores aguas abajo.
• Las mutaciones en GAB1 están asociadas a la sordera no sindrómica (DFNB26), lo que resalta su papel en la función auditiva.
• Sufre modificaciones de acetilación y empalme alternativo, que pueden modular su actividad.
• Se cuenta con información de su estructura 3D, que proporciona información sobre su arquitectura molecular.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético fosforilado correspondiente a los residuos alrededor de Tyr659 de GAB1 humano. Asegúrese de que su sistema de detección sea específico para la forma fosforilada; considere utilizar un anticuerpo no específico para fosfato como control.
• Para Western blot, el peso molecular predicho es de aproximadamente 77 kDa. Utilice el porcentaje de gel y las condiciones de transferencia adecuados para proteínas en este rango de masa. Valide la especificidad de la banda usando lisados tratados con fosfatasa o inhibidores relevantes.
• Para ELISA, el anticuerpo se puede usar como reactivo de captura o detección; se recomienda optimizar las condiciones de recubrimiento y la concentración del anticuerpo. Incluya péptido fosforilado como control positivo.
• Se ha demostrado reactividad cruzada con GAB1 humano y de ratón. Al usar muestras de ratón, tenga en cuenta el posible fondo de inmunoglobulinas endógenas de ratón si usa anticuerpos secundarios anti-conejo.
• Dado que GAB1 participa en múltiples vías de señalización (EGFR, INSR, MET/HGF), considere realizar una estimulación celular adecuada con factores de crecimiento (por ejemplo, EGF, insulina, HGF) antes de la preparación de la muestra para inducir la fosforilación en Tyr659.
• Como se trata de un anticuerpo policlonal de conejo, debe verificarse la consistencia entre lotes para aplicaciones cuantitativas críticas.

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