Anticuerpo pAb de conejo anti Receptor de Glucocorticoides fosforilado en S211 para WB, ELISA - P04150

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización del Receptor de Glucocorticoides

• El receptor de glucocorticoides (GR), codificado por el gen NR3C1, es un miembro de la subfamilia 3 del grupo C de receptores nucleares. Se generan múltiples isoformas mediante splicing alternativo e inicio alternativo de la traducción, cada una exhibiendo actividades transcripcionales y distribuciones tisulares distintas.

• El GR actúa como receptor de glucocorticoides, funcionando a través de un mecanismo dual: como factor de transcripción que se une a elementos de respuesta a glucocorticoides (GRE) en el ADN nuclear y mitocondrial, y como modulador de otros factores de transcripción. Esto influye en las respuestas inflamatorias, la proliferación celular y la diferenciación. Referencias relacionadas: PMID:27120390 PMID:37478846 PMID:28139699

• Está involucrado en la remodelación de la cromatina (PubMed:9590696) y desempeña un papel en la degradación rápida de mRNA al unirse a la región 5' UTR de los mRNA objetivo y reclutar la helicasa de ARN UPF1 y la enzima de decapado de mRNA DCP1A, lo que conduce a la degradación del ARN. Referencias relacionadas: PMID:9590696 PMID:25775514

• El GR media la activación y represión transcripcional (PubMed:11435610, PubMed:15769988, PubMed:15866175), promueve la apoptosis inducida por glucocorticoides (PubMed:23303127) y apoya la segregación cromosómica precisa durante la mitosis, lo que sugiere un papel supresor de tumores. Referencias relacionadas: PMID:11435610 PMID:15769988 PMID:15866175 PMID:23303127 PMID:25847991

• La distribución subcelular incluye el citoplasma, el núcleo, las mitocondrias, el huso, el centrosoma y la cromatina, reflejando su transporte dinámico y diversos sitios funcionales.

• El receptor se expresa ampliamente en tejidos como el hueso, el estómago, el pulmón, el hígado, el colon, la mama, el ovario, el páncreas, el riñón y el corazón, lo que indica su amplia relevancia fisiológica. Referencias relacionadas: PMID:25847991 PMID:10902803

• Las modificaciones post-traduccionales como la fosforilación, acetilación, metilación y ubiquitinación regulan la estabilidad del GR, su localización subcelular y su actividad transcripcional. La fosforilación en Ser211, dentro del dominio de transactivación N-terminal, modula la función del receptor.

• Las isoformas muestran una gama de potencias transcripcionales; por ejemplo, la isoforma Beta actúa como un inhibidor dominante negativo de la isoforma Alfa, afectando la unión de hormonas y la regulación génica, mientras que otras isoformas contribuyen al metabolismo de la glucosa y la sensibilidad a la insulina. Referencias relacionadas: PMID:20484466 PMID:7769088 PMID:8621628 PMID:26711253

Guía experimental y consejos técnicos

• Use inhibidores de fosfatasas durante la preparación de muestras para Western blot para preservar la señal de fosforilación en Ser211.
• Considere ensayos de bloqueo con péptidos utilizando el péptido fosforilado y su contraparte no fosforilada para confirmar la especificidad del anticuerpo.
• Para ELISA, el péptido inmunógeno puede servir como control positivo y para estandarizar las concentraciones de recubrimiento.
• Dado el peso molecular predicho de ~86 kDa, optimice el porcentaje de gel de poliacrilamida y las condiciones de electrotransferencia para una transferencia eficiente de proteínas de alto peso molecular.
• Valide el rendimiento del anticuerpo en líneas celulares humanas o de ratón estimuladas con glucocorticoides (p. ej., dexametasona) para confirmar la detección específica de la fosforilación.

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