Anticuerpo monoclonal de conejo Fosfo-HER2/ErbB2-Y1139 para WB y ELISA - P04626

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de HER2/ErbB2

• HER2 (Receptor tirosina-proteína quinasa erbB-2) es una proteína tirosina quinasa que forma parte de complejos receptores de superficie celular, requiriendo un correceptor para la unión del ligando. Es esencial para la señalización del receptor de neuregulina, aunque las neuregulinas no se unen a él directamente.
• Regula el crecimiento y la estabilización de los microtúbulos periféricos a través de la vía MEMO1-RHOA-DIAPH1, lo que conduce a la inhibición de GSK3B, la asociación de membrana de APC y CLASP2, y la captura de microtúbulos por MACF1.
• En el núcleo, HER2 actúa como factor de transcripción, uniéndose al promotor de PTGS2/COX-2 en 5'-TCAAATTC-3' y activando su transcripción, y está implicado en la activación de CDKN1A que involucra a STAT3 y SRC.
• También mejora la transcripción de ARNr por la ARN Pol I, promoviendo la síntesis de proteínas y el crecimiento celular.
• Subcelularmente, HER2 se localiza en la membrana celular, ruffles, endosomas tempranos, citoplasma (perinuclear) y núcleo, consistente con sus funciones duales de señalización y transcripción.
• Especificidad tisular: Se expresa en varios tejidos tumorales, incluidos tumores mamarios primarios y tumores de intestino delgado, esófago, riñón y boca.
• Características clave: Es una glicoproteína de membrana de tipo I de paso único con actividad quinasa, que contiene un sitio de unión a ATP, sitios de fosforilación y enlaces disulfuro. Está involucrada en reordenamientos cromosómicos, splicing alternativo y variantes de enfermedad.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El anticuerpo se generó contra un péptido sintético fosforilado que rodea la tirosina 1139 de HER2 humano. Para Western blot, considere usar condiciones de bloqueo específicas de fosforilación e inhibidores de fosfatasas apropiados durante la preparación de la muestra para preservar el epítopo fosfo.
• Dado el peso molecular predicho de 138 kDa, asegure condiciones de separación en gel y transferencia adecuadas para proteínas de alto peso molecular en Western blot.
• Para ELISA, es recomendable validar el anticuerpo con péptidos fosforilados y no fosforilados para confirmar la especificidad. Incluya controles positivos y negativos apropiados, como lisados de líneas celulares que sobreexpresen HER2 y tratadas con fosfatasa.
• Se reporta reactividad cruzada para humano; verifique la reactividad con otras especies si es necesario. Dado que HER2 es un receptor transmembrana, considere usar fracciones enriquecidas en membrana para una mejor detección.

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