Anticuerpo monoclonal de conejo anti-Fosfo-Histona H2AX-S139 para WB, IP, IF/ICC, ELISA - P16104

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Histona H2AX

• La Histona H2AX (H2A.X) es una variante de la histona H2A que reemplaza a la H2A convencional en un subconjunto de nucleosomas.
• Desempeña un papel central en la regulación de la transcripción, la reparación del ADN, la replicación del ADN y la estabilidad cromosómica al compactar el ADN en cromatina y regular su accesibilidad mediante modificaciones postraduccionales.
• La fosforilación en Ser139 (γ-H2AX) es crítica para reconocer las roturas de doble cadena del ADN (DSB) y reclutar la maquinaria de reparación del ADN, lo que la convierte en un marcador clave del daño del ADN.
• Es necesaria para la detención del ciclo celular mediada por puntos de control en respuesta a dosis bajas de radiación ionizante y para una reparación eficiente de DSB.
• Se localiza en el núcleo y está asociada con los cromosomas.
• Está sujeta a múltiples modificaciones postraduccionales, incluidas acetilación, fosforilación y ubiquitinación, que ajustan su función en la respuesta al daño del ADN.
• El gen H2AX (H2AFX) es miembro de la familia de genes de la histona H2A y está ampliamente conservado.
• Su peso molecular predicho es de aproximadamente 15 kDa, consistente con su migración típica en SDS-PAGE.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético fosforilado alrededor de la S139 de la Histona H2AX humana; para la detección fosfo-específica, considere incluir inhibidores de fosfatasas durante la preparación de la muestra.
• Para validar la especificidad del anticuerpo por la forma fosforilada, compare las señales de lisados no tratados frente a lisados tratados con fosfatasa.
• Para Western blot, se espera una banda alrededor de 15 kDa; asegúrese de utilizar marcadores de peso molecular adecuados.
• En inmunofluorescencia, los focos de γ-H2AX son un marcador clásico de roturas de doble cadena del ADN; considere inducir daño en el ADN con agentes como etopósido o radiación ionizante para mejorar la señal.
• Para ELISA, utilice un péptido fosforilado como antígeno de recubrimiento y su contraparte no fosforilada como control negativo.

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