Phospho-Histone H3-T3 Conejo pAb para WB, ELISA - Q16695 / P68431

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Histona H3

• La Histona H3.1t (también designada H3/g o H3.4) es una variante específica de testículo de la histona H3 canónica. Está codificada por el gen H3-4 (HIST3H3) y pertenece a la gran familia de histonas H3, que incluye genes adicionales como HIST1H3A.
• Como histona central, H3 se ensambla con H2A, H2B y H4 en el octámero de histonas que forma el nucleosoma, la unidad repetitiva fundamental de la cromatina. Los nucleosomas empaquetan el ADN en una estructura compacta que restringe el acceso a la información genética.
• Esta compactación juega un papel central en la regulación de la transcripción, la replicación del ADN, la reparación del ADN y la estabilidad cromosómica general. El desenrollado o remodelación controlada de los nucleosomas permite a la maquinaria celular leer, copiar o reparar la plantilla de ADN.
• La función de las histonas está regulada dinámicamente por un complejo conjunto de modificaciones postraduccionales en sus colas N-terminales: el "código de histonas". Estas incluyen fosforilación (por ejemplo, en Thr-3), acetilación, metilación y muchas otras, que actúan conjuntamente para modular el estado de la cromatina y reclutar proteínas efectoras posteriores.
• H3.1t se localiza exclusivamente en el núcleo y se integra en la cromatina. Consistente con su función en el empaquetamiento del ADN, está estrechamente asociada con los cromosomas a lo largo del ciclo celular.
• La expresión de H3.1t está en gran medida restringida a las células testiculares, lo que sugiere una función especializada en la reorganización de la cromatina durante la espermatogénesis. Otras variantes de H3 se expresan de manera más amplia y cumplen roles nucleosomales similares en células somáticas.
• Las palabras clave de UniProt para H3.1t incluyen "Fosfoproteína", "Acetilación", "Metilación", "Citrulinación" y "ADP‑ribosilación", destacando el extenso panorama de modificaciones que gobierna sus funciones.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un fosfopéptido sintético que abarca Thr-3 de HIST1H3A humana. Este diseño tiene como objetivo generar anticuerpos que reconozcan específicamente la forma fosforilada de la histona H3. Los investigadores deben confirmar la especificidad comparando las señales entre muestras tratadas con fosfatasa y no tratadas.
• El anticuerpo está validado para Western blotting (WB) y ELISA. Para WB, se pueden usar lisados celulares completos o extractos enriquecidos en histonas, y se espera una banda cerca de 15 kDa. La migración puede variar según el estado de modificación de H3. Incluya siempre inhibidores de fosfatasas durante la lisis y preparación de la muestra para preservar la señal de fosforilación.
• En ELISA, considere recubrir la placa con el péptido fosforilado o la proteína de histona fosforilada. Incluya controles apropiados (por ejemplo, péptido no fosforilado) para evaluar la especificidad de unión.
• Se predice una amplia reactividad cruzada (humano, ratón, rata y otros) debido a la alta conservación de la cola N-terminal de H3 en vertebrados. Sin embargo, se recomienda la validación en la especie y tejido relevantes antes de aplicaciones cuantitativas.
• Para aplicaciones de inmunohistoquímica o inmunocitoquímica, tenga en cuenta que el anticuerpo no fue desarrollado originalmente para estos formatos; es recomendable realizar pruebas piloto con condiciones de recuperación de antígeno y detección apropiadas.

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