pAb de conejo Phospho-HSF1-S326 para WB, ELISA - Q00613

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de HSF1 (Factor 1 de Shock Térmico)

• HSF1 funciona como un factor de transcripción inducible por estrés que impulsa la expresión de proteínas de shock térmico (HSP, por sus siglas en inglés) para proteger a las células del daño. En células no estresadas, se mantiene como un monómero inactivo en un complejo HSP90; después del estrés, forma trímeros, se une a los elementos de shock térmico (HSE, por sus siglas en inglés) y activa la transcripción de los genes HSP. Referencias relacionadas: PMID:11447121, PMID:12659875, PMID:12917326, PMID:11583998, PMID:16278218, PMID:9727490, PMID:10359787
• Después del estrés por shock térmico, HSF1 forma un complejo asociado a la cromatina con TTC5/STRAP y p300/EP300 para estimular la transcripción de la respuesta al shock térmico (HSR, por sus siglas en inglés), aumentando así la supervivencia celular. Referencias relacionadas: PMID:18451878
• HSF1 activa la transcripción de FOXR1, que a su vez regula al alza las chaperonas de shock térmico HSPA1A y HSPA6 y la reductora antioxidante DHRS2. Referencias relacionadas: PMID:34723967
• Más allá de la activación transcripcional, HSF1 reprime la transcripción de c-fos inducida por Ras, promueve el procesamiento del extremo 3' del pre-ARNm de HSP70 y media la exportación nuclear del ARNm de HSP70. Referencias relacionadas: PMID:9341107, PMID:14707147, PMID:17897941
• HSF1 desempeña un papel en la progresión mitótica y actúa como regulador negativo de la reparación del ADN por unión no homóloga de extremos (NHEJ, por sus siglas en inglés). Referencias relacionadas: PMID:18794143, PMID:26359349
• HSF1 participa en la reactivación latente del VIH-1 al unirse al promotor viral LTR y reclutar factores de elongación transcripcional.
• HSF1 se localiza en el núcleo, el citoplasma y se asocia con los polos del huso mitótico, los centrosomas y los cinetocoros. Está regulado por fosforilación en múltiples sitios, incluida la serina 326, que es fundamental para su activación.

Guía experimental y consejos técnicos

• Este anticuerpo se generó contra un fosfopéptido sintético que incluye la serina 326 de HSF1 humano y reconoce específicamente la forma fosforilada. Incluya inhibidores de fosfatasas en los tampones de lisis para proteger el epitopo.
• Para WB, el peso molecular esperado es de ~57 kDa. Utilice lisados de células humanas tratadas con shock térmico y sin tratar como controles positivo/negativo. Considere tratar las muestras con fosfatasa lambda para confirmar la especificidad por la forma fosforilada.
• En ELISA, optimice la concentración del antígeno de recubrimiento y la dilución del anticuerpo. Combine con un sistema de detección adecuado para el análisis cuantitativo.
• Valide la reactividad cruzada en su sistema experimental (se espera para muestras humanas).

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