Fosfo-INSR-Y1146/IGF1R-Y1131 pAb de conejo para WB, ELISA - P06213 / P08069

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de INSR e IGF1R

• El receptor de insulina (INSR) es una tirosina quinasa de receptor que media las acciones pleiotrópicas de la insulina tras la unión del ligando.
• El INSR activado fosforila sustratos intracelulares (IRS1-4, SHC), lo que conduce a la activación de dos vías de señalización principales: PI3K-AKT (acciones metabólicas) y Ras-MAPK (crecimiento y diferenciación celular).
• La vía PI3K-AKT promueve la translocación del transportador de glucosa SLC2A4/GLUT4, efectos antiapoptóticos (vía fosforilación de BAD) y la señalización mTORC1; la vía Ras-MAPK regula la expresión génica y coopera con PI3K para el crecimiento celular.
• El INSR forma receptores híbridos con IGF1R. Los receptores híbridos que contienen la isoforma Larga de INSR se activan con alta afinidad por IGF1, baja afinidad por IGF2 y no significativamente por insulina (PubMed:12138094); aquellos con la isoforma Corta son activados por IGF1, IGF2 e insulina. Otro estudio sugirió características de unión similares para ambos tipos híbridos (PubMed:16831875). Referencias relacionadas: PMID:12138094 PMID:16831875
• La localización subcelular incluye la membrana celular, endosomas tardíos y lisosomas, reflejando la internalización y el tráfico del receptor.
• Las isoformas Larga y Corta se expresan predominantemente en tejidos diana de la insulina (hígado, tejido adiposo, músculo esquelético) y también se encuentran en varios otros tejidos y tumores; la isoforma Corta se expresa preferentemente en células fetales.
• El INSR sufre autofosforilación en múltiples residuos de tirosina, incluyendo Y1146, que es crítico para la propagación de la señal descendente.
• Las características estructurales clave incluyen el splicing alternativo, dominios de unión a ligandos extracelulares, una hélice transmembrana y un dominio de tirosina quinasa intracelular.

Guía experimental y consejos técnicos

• Para la detección específica de fosfo, incluya inhibidores de fosfatasas en los tampones de lisis y valide la especificidad tratando las muestras con fosfatasa alcalina o utilizando competición con péptidos no fosforilados.
• Utilice controles positivos apropiados, como líneas celulares estimuladas con insulina, y monitoree las bandas cercanas a 155 kDa en el Western blot.
• Para ELISA, optimice las condiciones de recubrimiento y confirme la linealidad del ensayo con estándares de péptidos fosforilados.
• Tenga en cuenta que el anticuerpo puede reconocer tanto las formas fosforiladas de INSR como de IGF1R; verifique la identidad del objetivo en su sistema.

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