Anticuerpo monoclonal de conejo Phospho-IRAK4-Ser346 para WB, ELISA - Q9NWZ3

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de IRAK4

• IRAK4 (quinasa 4 asociada al receptor de interleucina-1), también conocido como antígeno de carcinoma renal NY-REN-64, está codificado por el gen IRAK4. Existen múltiples isoformas debido al empalme alternativo.
• IRAK4 es una quinasa serina/treonina esencial para iniciar respuestas inmunitarias innatas contra patógenos. Funciona aguas abajo de los receptores tipo Toll (TLR) y IL-1R, siendo reclutado rápidamente al complejo Mydosoma a través de MYD88. Referencias relacionadas: PMID:17878374
• Tras la activación, IRAK4 fosforila a IRAK1, estimulando su actividad quinasa y autofosforilación. También fosforila a las ligasas de ubiquitina E3 Pellino (PELI1, PELI2, PELI3) para promover la poliubiquitinación enlazada a K63 de IRAK1, lo que conduce a la activación del complejo TAK1 e IKK y a la translocación nuclear de NF-κB.
• IRAK4 también fosforila a TIRAP para promover su ubiquitinación y degradación, y fosforila a NCF1 para regular la actividad de la NADPH oxidasa durante la estimulación con LPS, contribuyendo a las respuestas antimicrobianas.
• Localizado predominantemente en el citoplasma.
• IRAK4 sufre fosforilación y acetilación, que son críticas para su activación y función.
• Las mutaciones en IRAK4 se asocian con trastornos de inmunodeficiencia (p. ej., IPD1, IMD67) y carcinoma renal (NY-REN-64), lo que subraya su papel en la defensa inmunitaria y el cáncer.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Dado que este anticuerpo es específico para la Ser346 fosforilada, incluya inhibidores de fosfatasas durante la preparación de la muestra para el western blot para preservar la señal de fosforilación.
• El inmunógeno es un fosfopéptido sintético; considere usar un péptido no fosforilado como control negativo para confirmar la unión dependiente de fosforilación.
• Para western blot, el peso molecular predicho es de aproximadamente 52 kDa. Asegure una carga proteica adecuada y utilice controles positivos apropiados, como células inmunitarias estimuladas.
• Para aplicaciones de ELISA, desarrolle un protocolo de detección fosfo-específico; el emparejamiento con un anticuerpo de IRAK4 total puede permitir un análisis proporcional de los niveles de fosforilación.
• Valide el anticuerpo en el sistema de muestras humanas relevante, ya que no se ha determinado la reactividad cruzada con otras especies.
• Optimice la dilución del anticuerpo y las condiciones de incubación para su configuración experimental específica.

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