Anticuerpo Policlonal de Conejo Phospho-IRS1-S312 para Western Blot - P35568

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización del IRS1

• El sustrato 1 del receptor de insulina (IRS1) es una proteína adaptadora de señalización crítica que media la transducción de señales desde el receptor de insulina (INSR) y el receptor I del factor de crecimiento similar a la insulina (IGF1R), desempeñando funciones esenciales en el desarrollo, el crecimiento, la homeostasis de la glucosa y el metabolismo de los lípidos. Referencias relacionadas: PMID:7541045, PMID:19639489
• Tras ser fosforilado por el receptor de insulina activado, el IRS1 actúa como una proteína de andamiaje/acoplamiento, reclutando proteínas que contienen el dominio SH2, como la subunidad reguladora p85 de la PI3K, NCK1, NCK2, GRB2 y SHP2, para propagar señales aguas abajo. Referencias relacionadas: PMID:11171109, PMID:8265614
• El reclutamiento del complejo GRB2-SOS1 conduce a la activación de la cascada Ras/Raf/MEK/MAPK, mientras que la activación de la vía PI3K/AKT media la mayoría de los efectos metabólicos de la insulina; ambas vías cooperan para regular la expresión génica, el crecimiento celular y la diferenciación.
• El IRS1 también actúa como un regulador positivo de la vía de señalización Wnt/β-catenina al suprimir la degradación mediada por autofagia de DVL2, promoviendo así la proliferación celular. Referencias relacionadas: PMID:24616100
• El IRS1 se localiza tanto en el citoplasma como en el núcleo, lo cual es consistente con sus funciones en la señalización y la regulación génica.
• La proteína está sujeta a extensas modificaciones postraduccionales, incluyendo fosforilación, ubiquitinación y S-nitrosilación, las cuales ajustan finamente su actividad y estabilidad; las palabras clave incluyen Fosfoproteína, Conjugación Ubl y Diabetes mellitus.
• Las mutaciones o la disregulación del IRS1 están asociadas con la resistencia a la insulina y la diabetes tipo 2, lo que subraya su importancia en las enfermedades metabólicas.
• El IRS1 humano tiene un peso molecular calculado de aproximadamente 131,6 kDa y migra a unos 132 kDa en SDS-PAGE.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido específico de fosfo correspondiente a los residuos que rodean la serina 312 del IRS1 humano. Debe confirmarse la especificidad por la forma fosforilada; considere el uso de lisados tratados con fosfatasa o bloqueo con péptido no fosforilado en su validación.
• La detección por Western blot del IRS1 típicamente produce una banda alrededor de 132 kDa; use marcadores de peso molecular apropiados y considere el comportamiento de migración conocido de la proteína.
• Para el IRS1 fosforilado, se espera que el tratamiento de las células con insulina o IGF-1 antes de la lisis mejore la señal; optimice el tiempo y la concentración de estimulación para su sistema.
• Este anticuerpo muestra reactividad cruzada con el IRS1 de ratón y rata según los datos del proveedor; valide en el sistema de muestra relevante usando los controles apropiados.
• Dada la susceptibilidad de los epítopos fosforilados, evite el despoje (stripping) y la nueva sondificación (reprobing) severas de las membranas; si es necesario, verifique que no se haya perdido la señal de fosfo.

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