pAb de conejo Phospho-LAT-Y171 para WB y ELISA - O43561

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de LAT

• LAT (Linker for activation of T-cells, Ligador de activación de linfocitos T) es una proteína adaptadora transmembrana de 36–38 kDa esencial para acoplar la unión del receptor de antígeno a las cascadas de señalización posteriores. Referencias relacionadas: PMID:23514740 PMID:25907557
• Actúa como un andamiaje central tras la estimulación del TCR, reclutando a PLCG1, GRB2, GRAP2 y otras moléculas para impulsar el flujo de calcio, la activación de MAPK y la reorganización del citoesqueleto.
• Más allá de los linfocitos T, LAT participa en la señalización mediada por FCGR3 en células asesinas naturales y en la desgranulación mediada por FCER1 en mastocitos, lo que destaca su papel en múltiples vías efectoras inmunes.
• La proteína se localiza en la membrana celular mediante una única hélice transmembrana y sufre modificaciones lipídicas, incluida la palmitoilación, que son fundamentales para la direccionamiento a balsas lipídicas y la formación de microgrupos de señalización.
• La extensa fosforilación de tirosinas, particularmente en Y171, actúa como sitio de unión para los adaptadores de la familia GRB2, lo que convierte a este residuo en un nodo clave del signalosoma del TCR.
• En humanos, LAT se expresa predominantemente en el timo, los linfocitos T, las células NK y los mastocitos, con una expresión débil en el bazo; no es detectable en los linfocitos B.

Guía experimental y consejos técnicos

• Este anticuerpo se generó contra un péptido fosforilado que incluye la tirosina 171; utilice inhibidores de fosfatasas adecuados durante la preparación de muestras para preservar el epítopo fosforilado.
• Para western blot, incluya un control de bloqueo con péptido no fosforilado para confirmar la fosfoespecificidad, y valide la detección en lisados de linfocitos T estimulados frente a reposo (por ejemplo, células Jurkat ± anti-CD3).
• En ELISA, el inmunógeno de fosfopéptido sintético puede servir como antígeno de fase sólida; considere utilizar una contraparte no fosforilada para restar la reactividad de fondo.
• La reactividad cruzada con otras especies no ha sido establecida; valide la reactividad en el sistema de muestras previsto antes de su uso rutinario.

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