Anticuerpo Monoclonal de Conejo Phospho-MEK1-T292 para WB, ELISA - Q02750

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de MEK1

• MEK1 (MAP2K1) es una proteína quinasa de doble especificidad esencial para la vía de señalización MAPK/ERK, catalizando la fosforilación de los residuos de treonina y tirosina en ERK1/2 (MAPK3/1) para propagar señales descendentes.
• Opera río abajo de RAS y RAF1, transduciendo señales desde factores de crecimiento, citoquinas y hormonas para controlar el crecimiento celular, la adhesión, la supervivencia y la diferenciación.
• MEK1 también promueve la activación de BRAF al asociarse con las proteínas de andamiaje KSR1 o KSR2, un mecanismo que alivia la autoinhibición y mejora la dimerización. Referencias relacionadas: PMID:29433126
• La proteína se localiza en múltiples sitios subcelulares, incluyendo el citoplasma, el centrosoma, el polo del huso, el núcleo y la membrana, facilitando su participación en diversos contextos de señalización y mitosis.
• MEK1 se expresa ampliamente con una abundancia muy baja en el cerebro, lo que es consistente con su ubicuo papel en la regulación de procesos celulares fundamentales.
• Las modificaciones postraduccionales como la fosforilación (p. ej., en Thr292) y la acetilación ajustan finamente la actividad de MEK1, y las mutaciones se asocian con cardiomiopatía, displasia ectodérmica y discapacidad intelectual.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un fosfopéptido sintético correspondiente a los residuos que rodean el Thr292 de MEK1 humano (UniProt Q02750). Para el Western blot, considere incluir inhibidores de fosfatasas en los tampones de lisis celular para mantener las señales dependientes de la fosforilación.
• En ELISA, la recubrimiento del antígeno con el péptido fosforilado puede requerir la optimización del tampón de recubrimiento y las condiciones de bloqueo para asegurar la especificidad fosforo.
• Dada la alta conservación de MEK1 entre humano, ratón y rata, se espera que este anticuerpo detecte la forma fosforilada en las tres especies; sin embargo, la reactividad cruzada debe confirmarse experimentalmente en las especies y tipos de tejidos/células relevantes.
• Para WB, el peso molecular predicho es de aproximadamente 43 kDa. Valide el tamaño de la banda usando controles apropiados de sitios fosforo (p. ej., tratamiento con fosfatasa lambda) para confirmar la especificidad.
• Como anticuerpo específico para fosfoproteínas, la consistencia lote a lote es crítica para aplicaciones cuantitativas como ELISA. Recomendamos la titulación y pruebas en paralelo con controles de péptidos no fosforilados para minimizar la variabilidad.

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