mAb de conejo anti-Fosfo-MLKL-S345 para WB, IP, ELISA - Q9D2Y4

Especificaciones y parámetros principales del producto

Información biológica: Función y localización de la proteína similar a quinasa de linaje mixta

• La proteína similar a quinasa de linaje mixta (MLKL) es una seudoquinasa esencial para la muerte celular necróptica. Puede existir una isoforma por empalme alternativo.
• MLKL es el efector final de la necroptosis inducida por TNF. Tras ser fosforilado por RIPK3, forma homotrímeros, se transloca a la membrana plasmática y desencadena la entrada de calcio y la ruptura de la membrana, ejecutando la necrosis programada. Referencias relacionadas: PMID:23835476, PMID:24012422, PMID:24019532
• A pesar de tener un dominio similar a quinasa, MLKL carece de actividad proteincinasa y funciona como una seudoquinasa. Referencias relacionadas: PMID:24012422
• En respuesta a la infección por ortomixovirus, la MLKL nuclear puede ser activada por ZBP1 y RIPK3, lo que provoca la desestabilización de la envoltura nuclear y la fuga de ADN inmunogénico al citosol. Referencias relacionadas: PMID:32200799, PMID:32296175
• MLKL se localiza predominantemente en el citoplasma, pero puede asociarse a la membrana celular y al núcleo según su estado de activación.
• MLKL se expresa abundantemente en el timo, colon, intestino, hígado, bazo y pulmón, con niveles menores en músculo esquelético, corazón y riñón, y está ausente en el cerebro.
• MLKL contiene un dominio de hélice enrollada y un sitio de unión a ATP, aunque no presenta actividad quinasa. Es una fosfoproteína regulada por múltiples eventos de fosforilación.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido fosforilado sintético correspondiente a la S441 de MLKL de ratón; confirme la especificidad del anticuerpo tratando las muestras con lambda fosfatasa o mediante competición con péptido no fosforilado.
• Para Western blot, se espera una banda alrededor de 54 kDa. Utilice controles positivos adecuados, como lisados de células de ratón tratadas con estímulo necróptico (por ejemplo, TNF + ZVAD + mimético de SMAC).
• En inmunoprecipitación, se recomienda realizar una pre-limpieza y optimizar la relación anticuerpo:lisado para reducir la señal de fondo.
• El rendimiento en ELISA puede depender de las condiciones de recubrimiento; pruebe tanto formatos de ELISA directo como sándwich.

CamelBio: Su puente de abastecimiento integral

CamelBio proporciona a fabricantes de diagnósticos y laboratorios de investigación soluciones integrales de materias primas para el estudio de la necroptosis y la muerte celular. Ofrecemos pares de anticuerpos validados, proteínas recombinantes y reactivos auxiliares para apoyar el desarrollo de ensayos. Para objetivos de alta demanda como MLKL, nuestra red de abastecimiento garantiza disponibilidad a granel y calidad consistente, reduciendo el tiempo de desarrollo.