mAb de conejo antiFosfo-mTOR-S2448 para WB, ELISA - P42345

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de mTOR

• El gen MTOR codifica una serina/treonina proteína quinasa que actúa como regulador central del metabolismo celular, el crecimiento y la supervivencia, integrando señales de hormonas, factores de crecimiento, nutrientes y estrés (PubMed:12087098, PubMed:12150925, PubMed:12150926). Referencias relacionadas: PMID:12087098 PMID:12150925 PMID:12150926
• Como parte del complejo mTORC1, promueve procesos anabólicos como la síntesis de proteínas a través de la fosforilación de EIF4EBP1 y RPS6KB1, la síntesis de lípidos y nucleótidos, y al mismo tiempo inhibe vías catabólicas como la autofagia mediante la fosforilación de ULK1 (PubMed:12087098, PubMed:12150925, PubMed:12150926, PubMed:24403073, PubMed:29236692, PubMed:18925875, PubMed:23429703, PubMed:23429704, PubMed:20516213, PubMed:23426360, PubMed:32561715, PubMed:20537536, PubMed:30704899, PubMed:23524951, PubMed:25438055, PubMed:21659604, PubMed:12231510, PubMed:22343943, PubMed:22576015, PubMed:22692423, PubMed:34289345). Referencias relacionadas: PMID:12087098 PMID:12150925 PMID:12150926 PMID:24403073 PMID:29236692 PMID:18925875 PMID:23429703 PMID:23429704 PMID:20516213 PMID:23426360 PMID:32561715 PMID:20537536 PMID:30704899 PMID:23524951 PMID:25438055 PMID:21659604 PMID:12231510 PMID:22343943 PMID:22576015 PMID:22692423 PMID:34289345
• En el complejo mTORC2, regula la proliferación celular, la supervivencia y la organización del citoesqueleto al fosforilar quinasas AGC como AKT (en Ser473), PKC y SGK1 (PubMed:15268862, PubMed:15467718, PubMed:24670654, PubMed:21376236, PubMed:15718470, PubMed:18925875). Referencias relacionadas: PMID:15268862 PMID:15467718 PMID:24670654 PMID:21376236 PMID:15718470 PMID:18925875
• mTOR se localiza en diversas membranas celulares: lisosomas, retículo endoplásmico, aparato de Golgi y mitocondrias, además de citoplasma y núcleo.
• Se expresa de forma generalizada, con niveles más altos en testículo, y está sujeto a modificaciones postraduccionales como fosforilación, acetilación y ubiquitinación.

Guía experimental y consejos técnicos

• Incluya inhibidores de fosfatasas en los tampones de lisis para conservar las señales de fosforilación durante la preparación de muestras para WB o ELISA.
• Valide la especificidad del anticuerpo usando lisados de control positivos (por ejemplo, estimulados con factores de crecimiento) y negativos (por ejemplo, tratados con fosfatasa o privados de suero).
• Para WB, utilice un porcentaje de gel y condiciones de transferencia adecuados para un objetivo de alto peso molecular (289 kDa); se recomienda un gel de separación al 6-8%.
• En ELISA, compare la unión a antígenos peptídicos fosforilados y no fosforilados para confirmar la especificidad por la forma fosforilada.

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