Fosfo-NF-κB p105-S932 mAb de conejo para WB, ELISA - P19838

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de NF-κB p105

• NFKB1 codifica la proteína precursora p105, que es procesada proteolíticamente para generar la subunidad p50 activa del complejo del factor de transcripción NF-κB (PubMed:1423592). Referencias relacionadas: PMID:1423592
• La subunidad p50 se asocia con RELA/p65 para formar el heterodímero p65-p50, el complejo NF-κB más abundante, que se une a los sitios κB (5'-GGRNNYYCC-3') en los promotores de genes diana para activar la transcripción (PubMed:1740106, PubMed:7830764). Referencias relacionadas: PMID:1740106, PMID:7830764
• NF-κB es un factor de transcripción pleiotrópico central para la respuesta inmune, la inflamación, la apoptosis y la proliferación celular, regulado por proteínas inhibidoras IκB y diversos estímulos.
• La proteína p105 contiene un dominio de homología Rel (RHD) en el extremo N-terminal y repeticiones de anquirina en el extremo C-terminal; funciona como un factor de retención citoplasmática para los dímeros NF-κB, secuestrándolos en un estado inactivo.
• Ante señales de activación, las quinasas IκB (IKK) fosforilan IκB, lo que conduce a su degradación y liberación de los dímeros NF-κB, que luego se translocan al núcleo para modular la expresión génica.
• Los homodímeros p50 actúan como represores transcripcionales a menos que se asocien con BCL3, lo que destaca la versatilidad regulatoria específica del dímero de NF-κB.
• Las modificaciones postraduccionales, que incluyen fosforilación, acetilación, ubiquitinación y S-nitrosilación, ajustan finamente la actividad de NF-κB; la fosforilación en residuos de serina (p. ej., S932) está implicada en el procesamiento y activación de p105.
• La localización subcelular es predominantemente citoplasmática para p105, mientras que los dímeros activos que contienen p50 se mueven entre el citoplasma y el núcleo.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un fosfopéptido sintético correspondiente a los residuos alrededor de Ser932 de NF-κB p105 humano. Para Western blot, espere una banda principal a aproximadamente 105 kDa (p105) y posiblemente una banda alrededor de 50 kDa (p50). Valide la especificidad de la fosforilación tratando los lisados con fosfatasa o comparando con un anticuerpo no específico para fosfo.
• Para aplicaciones de ELISA, determine el título y optimice la concentración del anticuerpo utilizando péptido fosforilado o lisados celulares estimulados. Incluya pasos de bloqueo apropiados para reducir la unión inespecífica.
• Dada la reactividad cruzada del anticuerpo con ratón y rata, considere el uso de líneas celulares relevantes (p. ej., Jurkat, HeLa, RAW 264.7) como controles positivos. La inducción de la señalización NF-κB con TNF-α, LPS o PMA/ionomicina puede mejorar la detección.
• Siempre incluya marcadores de peso molecular y controles apropiados para confirmar la especificidad, ya que los miembros de la familia NF-κB comparten similitud.

CamelBio: Su puente de abastecimiento integral

CamelBio capacita a los fabricantes de diagnóstico y a las instituciones de investigación con un cartera integral de materias primas para IVD, que incluye anticuerpos específicos para fosfo de alta calidad como este mAb NF-κB p105-S932. Con experiencia en inflamación y señalización inmune, ofrecemos pares de anticuerpos validados, anticuerpos monoclonales/policlonales a granel y reactivos auxiliares para acelerar el desarrollo de sus ensayos. Ya sea que necesite reactivos optimizados para objetivos establecidos o apoyo en el abastecimiento de especificidades raras, nuestra plataforma integral cubre la brecha desde el concepto hasta la clínica.