pAb de conejo Phospho-NF-kB p65/RelA-S536 - Q04206

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de NF-kB p65/RelA

• NF-kB p65/RelA es una subunidad del complejo del factor de transcripción NF-kB, un regulador pleiotrópico presente en casi todos los tipos de células que controla los genes involucrados en la inflamación, la inmunidad, la diferenciación, el crecimiento celular, la tumorigénesis y la apoptosis.
• La forma más abundante de NF-kB es el heterodímero RELA-NFKB1, que se une a los sitios de ADN kappa-B con una afinidad distintiva; diferentes combinaciones de dímeros actúan como activadores o represores transcripcionales.
• En células en reposo, NF-kB se mantiene retenido en el citoplasma por inhibidores de IkB; después de la estimulación, la fosforilación y degradación de IkB libera a NF-kB, permitiendo su translocación nuclear y la activación de genes diana.
• RELA sufre extensas modificaciones postraduccionales, que incluyen fosforilación, acetilación, metilación y ubiquitinación, que modulan su actividad transcripcional, estabilidad e interacciones proteicas. La fosforilación en S536 dentro del dominio de transactivación aumenta la producción transcripcional.
• Es esencial para la expresión de genes de citocinas en linfocitos T, conectando las respuestas inmunitarias innatas y adaptativas. Referencias relacionadas: PMID:15790681
• Un factor de transcripción clave que regula la respuesta al interferón durante la infección por SARS-CoV-2, lo que resalta su papel en la inmunidad innata antiviral. Referencias relacionadas: PMID:33440148
• La localización subcelular se desplaza dinámicamente entre el núcleo y el citoplasma, regulada por señales de localización nuclear e interacciones con IkB.

Guía experimental y consejos técnicos

• Utilice inhibidores de fosfatasas en los tampones de lisis e incubación para preservar el epítopo fosfo de S536 y evitar la pérdida de señal.
• Incluya siempre un anticuerpo total de NF-kB p65 como control de carga y normalización en experimentos de transferencia western para confirmar los cambios específicos de fosforilación.
• Para IHC-P, optimice la recuperación de antígeno y bloquee las peroxidasas endógenas; considere el tratamiento con fosfatasa de las secciones para verificar la tinción fosfoespecífica.
• En aplicaciones de ELISA, determine las diluciones óptimas de anticuerpo y las condiciones de detección de forma empírica para cada formato de ensayo.

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