Phospho-NF-kB p65/RelA-T505 Conejo pAb - Q04206

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de NF-kB p65/RelA

• NF-kB p65/RelA es una subunidad del complejo del factor de transcripción NF-kB, un regulador pleiotrópico activado por diversos estímulos para controlar genes involucrados en inflamación, inmunidad, crecimiento celular, diferenciación, tumorigénesis y apoptosis.
• El complejo NF-kB activo puede ser un homo- o heterodímero de proteínas de la familia Rel; el heterodímero RELA-p50 es la forma más abundante, que se une a sitios k-B en el ADN diana y actúa como activador transcripcional.
• Otros miembros de la familia Rel incluyen RELB, NFKB1 (p105/p50), NFKB2 (p52) y c-REL, con distintas combinaciones de dímeros que proporcionan especificidad y diversidad funcional.
• En células en reposo, NF-kB se retiene en el citoplasma a través de la interacción con proteínas inhibidoras I-kB; tras la estimulación, la fosforilación y degradación de I-kB libera a NF-kB para su translocación nuclear.
• RELA es esencial para la expresión de genes de citoquinas en células T, una función clave en la inmunidad adaptativa. Referencias relacionadas: PMID:15790681
• Durante la infección por SARS-CoV-2, RELA actúa como un factor de transcripción crítico que regula la respuesta de interferón. Referencias relacionadas: PMID:33440148
• La proteína sufre extensas modificaciones postraduccionales (por ejemplo, fosforilación, acetilación, metilación, ubiquitinación) que modulan su actividad, estabilidad e interacciones.
• La localización subcelular oscila entre el núcleo y el citoplasma, y la fosforilación en varios sitios (incluido Thr505) influye en la actividad transcripcional o la dinámica del complejo.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido fosforilado sintético que cubre Thr505, por lo que la reactividad del anticuerpo depende de la fosforilación. Asegúrese de preparar las muestras con inhibidores de fosfatasas para preservar el epítopo fosforilado.
• Para western blot, utilice protocolos estándar de SDS-PAGE y transferencia; el tamaño de banda esperado para RELA fosforilado es de ~60 kDa. Optimice las condiciones de bloqueo y dilución del anticuerpo empíricamente.
• En ELISA, puede utilizarse recubrimiento de placa con péptido fosforilado o lisado proteico; la reactividad cruzada con formas no fosforiladas debe evaluarse en el sistema experimental.
• Este anticuerpo es reactivo con muestras humanas; para otras especies, se debe verificar la homología de secuencia alrededor de Thr505 antes de su uso.

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