Anticuerpo Monoclonal de Conejo Phospho-NF-κB2-S866 para WB, ELISA - Q00653

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de NF-κB2 (p100/p52)

• NF-κB2 codifica la subunidad p100, la cual es procesada proteolíticamente para generar la subunidad de unión a ADN p52. p100 es la forma principal, mientras que p52 es la forma minoritaria, producida mediante la activación no canónica de NF-κB.
• El complejo NF-κB es un factor de transcripción homodimérico o heterodimérico que regula la inflamación, la inmunidad, el crecimiento celular y la apoptosis. p52 forma heterodímeros con RelB para activar la transcripción u homodímeros para reprimirla.
• En la vía no canónica, la fosforilación de p100 en S866 (y otros residuos) desencadena el procesamiento dependiente de ubiquitina a p52, permitiendo la translocación nuclear y la activación de genes diana.
• NF-κB2 se localiza tanto en el citoplasma como en el núcleo; p100 retiene principalmente las proteínas NF-κB asociadas en el citoplasma, mientras que los dímeros p52 se trasladan al núcleo tras la estimulación.
• p52 se une a la secuencia de consenso de ADN κB 5'-GGRNNYYCC-3' en los potenciadores de genes inmunes y de respuesta de fase aguda.
• En conjunto con RELB, NF-κB2 regula el reloj circadiano reprimiendo la actividad de activador transcripcional del heterodímero CLOCK-BMAL1.
• La proteína es una fosfoproteína con múltiples modificaciones; las mutaciones en NFKB2 se asocian con inmunodeficiencia variable común (CVID10).

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Este anticuerpo se generó contra un fosfopéptido sintético correspondiente a S866 de p100 humano, y por lo tanto reconoce NF-κB2 solo cuando está fosforilado en este residuo.
• Para la transferencia Western (western blotting), verifique la detección de una banda de ~97 kDa (p100) y posiblemente una banda de ~52 kDa (p52) en lisados de células estimuladas para activar la vía no canónica de NF-κB (por ejemplo, con linfofotoxina β o anticuerpos anti-LTβR).
• Dado que el anticuerpo reacciona de forma cruzada con NF-κB2 de ratón, puede ser adecuado para estudios en modelos de ratón; sin embargo, valídelo en el tejido o tipo celular relevante.
• Para ELISA, considere usar el anticuerpo como reactivo de captura o detección con los controles apropiados para asegurar la especificidad fosfo.

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