Phospho-NFKB1-S337 Rabbit PolymAb® para WB - P19838

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de NFKB1

• NFKB1 codifica el precursor p105, que sufre procesamiento mediado por el proteasoma para generar la subunidad p50 activa del complejo del factor de transcripción NF-κB (PubMed:1423592). Referencias relacionadas:
  PMID:1423592

• La subunidad p50 forma homodímeros o heterodímeros con otros miembros de la familia NF-κB/Rel como RELA/p65, RELB y REL, uniéndose a la secuencia de ADN de consenso κB 5'-GGRNNYYCC-3' para regular la expresión génica (PubMed:1740106, PubMed:7830764). Referencias relacionadas:
  PMID:1740106
  PMID:7830764

• NF-κB es un mediador central de las respuestas inmunes e inflamatorias, el crecimiento celular, la diferenciación y la apoptosis, siendo el heterodímero p65-p50 el complejo más abundante y de activación transcripcional.

• Los dímeros inactivos de NF-κB se retienen en el citoplasma por los inhibidores IκB; tras la estimulación, IκB se fosforila y degrada, permitiendo que NF-κB se transloque al núcleo y active los genes diana.

• NFKB1 también funciona como un ancla de retención citoplasmática a través de p105 para las proteínas NF-κB asociadas y, en complejo con MAP3K8, reprime la señalización MAPK hasta que la degradación de p105 libera MAP3K8 activa.

• La proteína está sujeta a múltiples modificaciones postraduccionales, incluyendo fosforilación, acetilación, ubiquitinación e hidroxilación, que modulan su actividad, estabilidad y localización subcelular.

• La localización subcelular incluye tanto el citoplasma como el núcleo, reflejando su doble función en el secuestro de señales y la regulación transcripcional.

• Las isoformas alternativas producidas por splicing alternativo contribuyen a la diversidad funcional; la proteína p105 de longitud completa (105 kDa) y la subunidad procesada p50 (50 kDa) se detectan en la mayoría de los tipos celulares.

Guía experimental y consejos técnicos

• Dada la naturaleza específica de fosfo de este anticuerpo, es esencial incluir inhibidores de fosfatasas en los tampones de lisis para preservar la señal de fosforilación durante la preparación de la muestra.
• Para Western blot, se recomienda un control positivo con activación conocida de la vía NF-κB (p. ej., células tratadas con TNF-α); debe verificarse la detección de bandas alrededor de 105 kDa (p105) y 50 kDa (p50).
• En inmunohistoquímica, se deben optimizar las condiciones de recuperación de antígenos y la dilución del anticuerpo; asegúrese de que el patrón de tinción refleje la localización nuclear/citoplasmática esperada tras la activación de la vía.
• El anticuerpo es adecuado para ELISA; considere el uso de péptido fosforilado como estándar para ensayos cuantitativos.

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