Fosfo-p38 MAPK-T180 pAb de conejo para WB, IHC-P, ELISA - Q16539

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de p38 MAPK

• MAPK14 codifica la proteína quinasa activada por mitógenos p38 alfa, una serina/treonina quinasa esencial para las respuestas celulares al estrés, citocinas proinflamatorias y mitógenos.
• Es uno de los cuatro miembros de la familia p38 MAPK (alfa, beta, gamma, delta) y se conoce por múltiples alias, incluyendo CSBP, SAPK2A y MXI2.
• Tras la activación mediante doble fosforilación en Thr-180 y Tyr-182, p38 alfa fosforila una amplia gama de sustratos, incluyendo quinasas descendentes MAPKAPK2/MK2, RPS6KA5/MSK1 y MKNK1/MNK1, regulando así la expresión génica, la estabilidad del mRNA y la síntesis de proteínas. Referencias relacionadas: PMID:9687510, PMID:9792677, PMID:11154262
• En el núcleo, la p38 MAPK activada fosforila directa o indirectamente factores de transcripción como ATF1, ATF2, ELK1, p53/TP53 y MEF2C, modulando la expresión de genes inmediatos y programas transcripcionales inducidos por estrés. Referencias relacionadas: PMID:10330143, PMID:9430721, PMID:9858528
• La p38 MAPK también desempeña un papel citoplasmático en la regulación del recambio de proteínas, la endocitosis y la autofagia; por ejemplo, fosforila SIAH2 y modula el tráfico de ATG9. Referencias relacionadas: PMID:17003045, PMID:19893488
• El splicing alternativo genera las isoformas MXI2 (activada por mitógenos/estrés oxidativo; actividad quinasa débil hacia ELK1 y ATF2) y EXIP (proapoptótica).
• La fraccionamiento subcelular revela p38 MAPK tanto en el citoplasma como en el núcleo, lo que coincide con sus roles duales de señalización y transcripcionales.
• La p38 MAPK se expresa en la mayoría de los tejidos, con los niveles más altos en cerebro, corazón, placenta, páncreas y músculo esquelético.

Guía experimental y consejos técnicos

• Dado que el inmunógeno es un péptido fosforilado sintético alrededor de Thr-180 de MAPK14 humana, se espera que este anticuerpo reconozca específicamente la forma fosforilada y activa de p38 MAPK. Para una detección óptima, asegúrese de que las muestras se preparen en condiciones que preserven la fosforilación de las proteínas (p. ej., use inhibidores de fosfatasas y evite incubaciones prolongadas a temperatura ambiente).
• Para la transferencia Western (Western blot, WB), considere usar un método de enriquecimiento de proteínas de baja abundancia si la fosforilación endógena de p38 es débil; el peso molecular predicho es de aproximadamente 41 kDa.
• En inmunohistoquímica (IHC-P), la recuperación de antígenos y la dilución del anticuerpo deben determinarse empíricamente; una señal específica para fosfo-p38 puede validarse pretratando las secciones de tejido con fosfatasa lambda.
• Para aplicaciones de ELISA, use un estándar de p38 fosforilada recombinante cuando sea posible y confirme la linealidad y especificidad usando controles de péptidos no fosforilados.
• Se ha observado reactividad cruzada con humano, ratón y rata, pero se recomienda la validación en su sistema experimental específico.

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