mAb de conejo Phospho-p53-S33 para WB y ELISA - P04637

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de p53

• Codificado por el gen TP53, el antígeno tumoral celular p53 es una fosfoproteína que presenta múltiples isoformas debido al empalme alternativo y el uso de diferentes promotores.
• Actúa como un factor de transcripción multifuncional que induce la detención del ciclo celular, la reparación del ADN o la apoptosis ante daños en el material genético. Referencias relacionadas: PMID:11025664, PMID:12524540, PMID:12810724
• Funciona como un supresor tumoral crucial al regular negativamente la división celular mediante el control de la expresión génica. Referencias relacionadas: PMID:11025664, PMID:12524540, PMID:12810724
• Promueve la apoptosis mediante la estimulación de la expresión de los antígenos BAX y FAS o la represión de Bcl-2; su actividad se modula por la interacción con proteínas ASPP. Referencias relacionadas: PMID:12524540, PMID:17189187
• Se localiza en múltiples compartimentos subcelulares, entre ellos el núcleo, el citoplasma, las mitocondrias, el centrosoma y el retículo endoplásmico, lo que coincide con sus diversos roles regulatorios.
• Está sujeto a extensas modificaciones postraduccionales, que incluyen la fosforilación en serinas como S33, acetilación, metilación y ubiquitinación, que regulan su estabilidad y actividad transcripcional.
• Se expresa de forma ubicua con una distribución de isoformas dependiente del tejido; ciertas isoformas pueden ejercer efectos dominantes negativos sobre las funciones canónicas de p53.
• Regula el reloj circadiano al reprimir la activación transcripcional mediada por CLOCK-BMAL1 de PER2. Referencias relacionadas: PMID:24051492

Guía experimental y consejos técnicos

• Debido a que este anticuerpo se dirige a la fosforilación en S33, agregue inhibidores de fosfatasas a los tampones de lisis y manipule las muestras en hielo para preservar el estado de fosforilación.
• Para Western blot, considere usar un régimen de bloqueo específico para fosfoproteínas y confirme la especificidad comparando las señales antes y después del tratamiento con fosfatasa o la competición con péptido.
• En ELISA, capture o detecte p53 fosforilado en lisados celulares; incluya controles no fosforilados y sin tratamiento para validar la especificidad por la forma fosforilada.
• La abundancia de p53 puede ser baja en condiciones normales; el enriquecimiento por inmunoprecipitación o el tratamiento con agentes dañinos del ADN pueden mejorar la detección.

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