Anticuerpo policlonal de conejo Phospho-p90Rsk/RSK1/RPS6KA1-S380 para WB, IP, ELISA - Q15418

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de RPS6KA1 (p90Rsk/RSK1)

• Codifica la proteína quinasa alfa-1 de proteína ribosomal S6 de 90 kDa (p90-RSK 1), también conocida como MAPKAP-quinasa 1a (MAPKAPK1a) y RSK-1, miembro de la familia de serina/treonina quinasas AGC.
• Funciona como un efector aguas abajo clave de la cascada ERK/MAPK, mediando señales mitogénicas e inducidas por estrés que regulan la transcripción, traducción, proliferación celular, supervivencia y diferenciación. Referencias relacionadas: PMID:10679322, PMID:12213813, PMID:15117958
• Fosforila los factores de transcripción CREB1, NR4A1/NUR77 y ETV1/ER81 después de la estimulación con EGF o PMA, impulsando la expresión de genes de respuesta inmediata y las respuestas mitogénicas. Referencias relacionadas: PMID:18508509, PMID:18813292, PMID:12213813, PMID:16223362
• Estimula la traducción dependiente de caperuza al fosforilar EIF4B y promueve el ensamblaje del complejo de preiniciación a través de la fosforilación de RPS6. Referencias relacionadas: PMID:16763566, PMID:17360704
• Integra señales de nutrientes y crecimiento al fosforilar directamente TSC2 y RPTOR para modular la actividad de mTORC1, y fosforila DEPTOR para el control de retroalimentación de mTORC1/2. Referencias relacionadas: PMID:15342917, PMID:22017876
• Promueve la supervivencia celular al fosforilar e inhibir las proteínas proapoptóticas BAD y DAPK1. Referencias relacionadas: PMID:10679322, PMID:16213824
• Regula la progresión G1/S al fosforilar CDKN1B/p27KIP1, lo que conduce a su retención citoplasmática y previene la inhibición de las quinasas dependientes de ciclina nuclear. Referencias relacionadas: PMID:18508509, PMID:18813292
• Se localiza tanto en el núcleo como en el citoplasma, lo que coincide con sus funciones duales en la regulación transcripcional y la señalización citoplasmática.
• Durante la infección por herpesvirus asociado al sarcoma de Kaposi/HHV-8, RSK1 constitutivamente activo promueve la transcripción y traducción de genes líticos virales.
• La fosforilación en Ser380, ubicada en el motivo hidrófobo, es esencial para la activación completa de la quinasa; este anticuerpo reconoce específicamente el epítopo de Ser380 fosforilado.

Orientación experimental y consejos técnicos

• Dado que este anticuerpo se dirige al epítopo de Ser380 fosforilado, valide la especificidad comparando lisados de células estimuladas frente a no estimuladas (por ejemplo, células ayunadas de suero frente a células tratadas con EGF o PMA) y tratando los lisados con fosfatasa lambda.
• Para transferencia Western (Western blotting), prepare las muestras con inhibidores de fosfatasa y utilice marcadores de peso molecular adecuados; la banda predicha es de aproximadamente 83 kDa, aunque la fosforilación puede causar un ligero corrimiento.
• Se informa reactividad cruzada para humano, ratón y rata; al probar otras especies, verifique la homología de secuencia alrededor de Ser380 en la proteína diana.
• La inmunoprecipitación funciona en condiciones nativas; considere el uso de tampones de lisis suaves que preserven las interacciones proteína-proteína y el estado de fosforilación.
• Para aplicaciones de ELISA, utilice un antígeno de recubrimiento de péptido fosforilado o capture la proteína endógena de extractos celulares; evalúe la linealidad y el fondo usando controles de péptido no fosforilado.
• Almacene el anticuerpo a –20 °C después de su recepción y evite ciclos repetidos de congelación-descongelación; el envío en hielo garantiza su estabilidad.

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