Fosfo-PDGFR alfa-Y1018 pAb de conejo para WB, ELISA - P16234

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización del receptor alfa del factor de crecimiento derivado de plaquetas

• El receptor alfa del factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGFRA, también conocido como CD140a o PDGFR-2) es un receptor de tirosina cinasa de superficie celular perteneciente a la familia PDGFR. Se une a los ligandos PDGFA, PDGFB y PDGFC, mediando señales esenciales para la proliferación, supervivencia, migración y diferenciación celular.
• PDGFRA desempeña un papel crítico en el desarrollo embrionario, incluida la formación normal del esqueleto, el cierre cefálico y el desarrollo de la mucosa gastrointestinal y las vellosidades intestinales. También es necesario para el reclutamiento de células mesenquimáticas.
• En la cicatrización de heridas y la activación plaquetaria, la señalización de PDGFRA promueve la migración celular y la quimiotaxis, y contribuye a la agregación plaquetaria inducida por trombina y la secreción de agonistas de gránulos.
• El receptor se localiza en la membrana celular, así como en proyecciones celulares como cilios y el aparato de Golgi. Su distribución subcelular está regulada por la unión y activación de ligandos.
• PDGFRA sufre autofosforilación en múltiples residuos de tirosina, incluida Y1018, lo que crea sitios de acoplamiento para moléculas de señalización descendente como PLCG1, PIK3R1 y PTPN11, lo que lleva a la activación de las vías MAPK/ERK, PI3K/AKT y STAT.
• La expresión específica del tejido es generalizada; se detecta en cerebro, fibroblastos, músculo liso, corazón y embriones, así como en tumores de colon primarios y metastásicos. También se encuentra en plaquetas a nivel proteico.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen fosforilación, glicosilación y ubiquitinación, que regulan la actividad, el tráfico y la degradación del receptor.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a un péptido fosforilado alrededor de la tirosina 1018 (Y1018) en el dominio intracelular del PDGFRA humano. Este sitio es un sitio conocido de autofosforilación crítico para la señalización descendente.
• El anticuerpo es adecuado para aplicaciones de Western Blot (WB) y ELISA, según se indica. Para WB, considere usar controles positivos apropiados (por ejemplo, lisados celulares estimulados donde PDGFRA está fosforilado) y valide la especificidad de la detección de fosforilación comparando muestras tratadas vs no tratadas.
• Dado que PDGFRA es un receptor transmembrana, los protocolos de extracción de proteínas de membrana pueden mejorar la detección. El peso molecular predicho es de 123 kDa; considere usar porcentajes de gel apropiados y condiciones de transferencia para proteínas de alto peso molecular.
• Para ELISA, la especificidad fosfo-específica debe confirmarse usando péptidos fosforilados vs no fosforilados o a través de experimentos de tratamiento con fosfatasa.
• Tenga en cuenta que la reactividad cruzada se informa para humano; la reactividad con otras especies debe validarse experimentalmente si se requiere.

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