mAb de conejo anti-Fosfo-PDHA1-S293 - P08559

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de PDHA1

• PDHA1 (subunidad alfa del componente E1 de la piruvato deshidrogenasa, forma somática, mitocondrial), también conocido como PDHE1-A tipo I, está codificado por el gen PDHA1 en humanos. Es una enzima metabólica crucial que, junto con PDHB, constituye la subunidad E1 heterotetramérica del complejo piruvato deshidrogenasa (PDH).
• El complejo PDH cataliza la conversión general de piruvato a acetil-CoA y CO2, conectando la glucólisis citoplasmática con el ciclo del ácido tricarboxílico (TCA) mitocondrial. Referencias relacionadas: PMID:19081061 PMID:7782287
• Específicamente, la subunidad E1 cataliza la descarboxilación del piruvato dependiente de pirofosfato de tiamina (TPP) y la acetilación reductora de grupos lipoil unidos covalentemente al componente E2. Referencias relacionadas: PMID:17474719 PMID:19081061 PMID:7782287
• PDHA1 pertenece a la familia de genes del complejo piruvato deshidrogenasa; las mutaciones en este gen se asocian con enfermedades mitocondriales primarias y el síndrome de Leigh.
• A nivel subcelular, PDHA1 se localiza en la matriz mitocondrial, lo que coincide con su función en el metabolismo del piruvato.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen fosforilación (por ejemplo, en Ser293) y acetilación, que modulan la actividad enzimática. Palabras clave: Acetilación, Fosfoproteína, Pirofosfato de tiamina, Magnesio, Unión a metales.
• La proteína se expresa de forma ubicua en todos los tejidos.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido fosforilado sintético correspondiente a los residuos alrededor de la Ser293 de la PDHA1 humana, dirigido a un epítopo específico de fosforilación. Esto hace que el anticuerpo sea adecuado para detectar PDHA1 fosforilada endógenamente en condiciones de estimulación apropiadas.
• Para Western blot, PDHA1 tiene un peso molecular predicho de 43 kDa; considere optimizar el bloqueo y la dilución del anticuerpo primario usando lisados de células/tejidos de humano, ratón o rata.
• Para inmunoprecipitación, el formato monoclonal de conejo puede ofrecer una alta especificidad; valide la eficiencia de captura con controles positivos y negativos para fosforilación.
• Las aplicaciones de ELISA están validadas; optimice el antígeno de recubrimiento y las condiciones de detección para el análisis cuantitativo de fosforilación.
• La reactividad cruzada reportada incluye ratón y rata; verifique la homología de secuencia alrededor del sitio de fosforilación si extiende el estudio a otras especies.

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