pAb de conejo Phospho-PDK1/PDPK1-S241 - O15530

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de PDK1 (proteína quinasa 1 dependiente de 3-fosfoinositido)

• PDPK1 (PDK1) codifica una serina/treonina quinasa expresada de forma ubicua que actúa como regulador principal de la familia de quinasas AGC, incluidas PKB/AKT, p70 S6K, p90 RSK y las isoformas de PKC. Referencias relacionadas: PMID:10226025 PMID:10480933 PMID:10995762

• En la señalización por insulina, PDK1 fosforila y activa AKT1 en Thr308, propagando señales descendentes que controlan la captación de glucosa, la síntesis de glucógeno y la supervivencia celular. Referencias relacionadas: PMID:10226025 PMID:12167717 PMID:9094314

• PDK1 se localiza en el citoplasma, el núcleo, la membrana celular y las adhesiones focales, lo que permite una señalización diversa desde múltiples compartimentos celulares.

• La forma fosforilada en tirosina de PDK1 es esencial para la dinámica de las adhesiones focales y se sobreexpresa en tejidos enfermos de pulmón, hígado, colon y mama. Referencias relacionadas: PMID:14585963

• PDK1 modula vías adicionales: regula negativamente la señalización de TGF-beta mediante la fosforilación de proteínas SMAD y activa NF-κB mediante la fosforilación de IKKB, influyendo en las respuestas inflamatorias e inmunitarias. Referencias relacionadas: PMID:17327236 PMID:16207722

• PDK1 es fundamental para la motilidad y la quimiotaxis de las células endoteliales vasculares, participando en procesos angiogénicos. Referencias relacionadas: PMID:17371830

Guía experimental y consejos técnicos

• Los anticuerpos fosfo-específicos requieren una manipulación cuidadosa de la muestra: agregue inhibidores de fosfatasas a los tampones de lisis y evite la incubación prolongada de la muestra a temperatura ambiente.
• Para Western blotting, trate una parte de la muestra con fosfatasa lambda para confirmar la especificidad fosfo de la banda de ~63 kDa.
• En inmunofluorescencia (IF/ICC), las condiciones de fijación y permeabilización pueden afectar la accesibilidad del epítopo; pruebe múltiples métodos de fijación (por ejemplo, metanol vs formaldehído) para obtener una señal óptima.
• Dada la reactividad cruzada con ratón y rata, valide el anticuerpo en el modelo de especie previsto mediante la alineación de secuencias del sitio de fosforilación y la región del antígeno.
• Las aplicaciones de ELISA pueden beneficiarse del uso de un competidor de péptido fosforilado para garantizar la especificidad de la señal.

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