Anticuerpo Policlonal de Conejo Phospho-PI3KP85α/P55γ/P85β-Y467/Y464/Y199 para WB - P27986 / O00459 / Q92569

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de las Subunidades Reguladoras de PI3K (p85α/p55γ/p85β)

• PIK3R1 codifica la subunidad reguladora alfa de la fosfatidilinositol 3-cinasa, también conocida como PI3-cinasa p85-alfa. Existen múltiples isoformas mediante splicing alternativo, incluyendo la isoforma 2 que se expresa en el músculo esquelético y el cerebro.
• La subunidad p85-alfa actúa como un adaptador, uniéndose a proteínas tirosina cinasas activadas (fosforiladas) a través de su dominio SH2, mediando la asociación de la subunidad catalítica p110 con la membrana plasmática.
• Es necesaria para la captación de glucosa estimulada por insulina y la síntesis de glucógeno en tejidos sensibles a la insulina, desempeñando un papel clave en la señalización de insulina.
• Desempeña un papel en la señalización corriente abajo de varios receptores de factores de crecimiento, incluidos FGFR1-4, KIT, PDGFRA y PDGFRB, así como en la señalización de la integrina ITGB2. Referencias relacionadas: PMID:17626883 PMID:19805105 PMID:7518429
• Modula la respuesta celular al estrés del RE al promover la translocación nuclear de la isoforma 2 de XBP1, contribuyendo a la mejora de la tolerancia a la glucosa bajo sobrecarga metabólica en el hígado. Referencias relacionadas: PMID:20348923
• Se localiza principalmente en el citoplasma, donde interactúa con múltiples socios de señalización.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la fosforilación (en residuos de tirosina como Y467), acetilación y ubiquitinación, regulando su actividad y estabilidad.
• La disregulación de los componentes de la vía PI3K está implicada en el cáncer, trastornos metabólicos y enfermedades del desarrollo como el enanismo.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético específico de fosfo correspondiente a los residuos que rodean a Y467 de PIK3R1/PIK3R2/PIK3R3 humano. Debido a la conservación de la secuencia, el anticuerpo presenta reactividad cruzada con las especies de ratón y rata.
• Para el Western blot, desnaturalice las muestras en tampón Laemmli y cargue de 20 a 30 µg de proteína total por carril. Las bandas detectadas pueden aparecer entre 42–54 kDa (p55γ/p85β) y 81–84 kDa (p85α), dependiendo de la isoforma específica.
• Los anticuerpos específicos de fosforilación requieren un manejo cuidadoso: evite ciclos repetidos de congelación-descongelación y considere el uso de inhibidores de fosfatasas durante la preparación de la muestra para preservar las señales de fosforilación.
• Incluya controles positivos apropiados (por ejemplo, lisados celulares estimulados con insulina o tratados con factores de crecimiento) y controles negativos (bloqueo con péptido no fosforilado o tratamiento con fosfatasa) para confirmar la especificidad.

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