mAb de conejo anti-Fosfo-PKC alfa-T410+PKC delta-T410 para WB, ELISA - P17252 / Q05655

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de PKC alfa y PKC delta

• PRKCA (PKC alfa) es una serina/treonina proteína quinasa dependiente de calcio, fosfolípidos y DAG de la familia PKC, que también incluye a PRKCD (PKC delta). Regula la proliferación celular, apoptosis, diferenciación, migración y adhesión, y se encuentra altamente expresada en diversos cánceres, actuando como promotor tumoral.
• PRKCA fosforila sustratos clave como RAF1, BCL2 y TNNT2, modulando así la cascada de señalización MAPK/ERK y la apoptosis. Por ejemplo, la fosforilación de BCL2 promueve la supervivencia celular en células de leucemia.
• PRKCA desempeña un papel fundamental en la motilidad celular: después de una lesión, se transloca a los lamelipodios y fosforila CSPG4, induciendo la reorganización del citoesqueleto y la migración polarizada.
• La quinasa se localiza en el citoplasma, membrana celular, membrana mitocondrial y núcleo, siendo la translocación inducida por estímulos esencial para sus funciones específicas según el contexto.
• La fosforilación del bucle de activación (T410 en PKC delta, equivalente en PKC alfa) es esencial para la actividad quinasa. Este anticuerpo monoclonal reconoce específicamente a PKC alfa y delta fosforilados en T410.
• En el sistema cardiovascular, PRKCA regula negativamente la contractilidad miocárdica y promueve la angiogénesis y la hipertrofia de los cardiomiocitos, en parte a través de la señalización MAPK1/3, lo que lo vincula a la insuficiencia cardíaca.
• PRKCA fosforila DOCK8 para controlar CDC42 en la migración de linfocitos T (PubMed:28028151) y fosforila KLHL3 en el transporte de iones renales (PubMed:25313067). También activa LRRK1 para regular el tráfico de proteínas RAB (PubMed:36040231). Referencias relacionadas:
  • PMID:28028151
  • PMID:25313067
  • PMID:36040231

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno fue un fosfopéptido sintético correspondiente a los residuos alrededor de T410 de PRKCZ humana, que comparte homología con las secuencias del bucle de activación de PKC alfa y delta. Los usuarios deben verificar que el anticuerpo reconoce las fosfoproteínas esperadas en su sistema experimental.
• Las aplicaciones recomendadas incluyen WB y ELISA. Para WB, los pesos moleculares predichos son 76 kDa (PKC alfa) y 77 kDa (PKC delta). Utilice controles positivos (por ejemplo, células estimuladas con PMA) y negativos (tratados con fosfatasa o no estimulados) adecuados.
• Para confirmar la fosfo-especificidad, considere realizar un tratamiento con fosfatasa de los lisados antes del análisis por WB.
• Para ELISA, siga los protocolos estándar para anticuerpos fosfo y optimice las condiciones de recubrimiento y detección para mejorar la sensibilidad.
• Dado que el anticuerpo es monoclonal de conejo, ofrece alta reproducibilidad y consistencia entre lotes, siendo adecuado para estudios cuantitativos.

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