Fosfo-PLC gamma 1 (PLCG1)-Y783 pAb de conejo para WB, ELISA - P19174

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de Fosfo-PLC gamma 1 (PLCG1)-Y783

• PLCG1 codifica la fosfodiesterasa gamma-1 de 1-fosfatidilinositol 4,5-bisfosfato, una enzima clave en la señalización de fosfoinosítidos. Hidroliza PIP2 para generar los segundos mensajeros DAG e IP3, que movilizan calcio y activan la proteína cinasa C.
• Se activa río abajo de los receptores de tirosina cinasa (p. ej., PDGFRA, PDGFRB, EGFR, FGFRs), desempeñando un papel crítico en la transducción de señales de factores de crecimiento a vías intracelulares.
• PLCG1 participa en la reorganización de la actina y la migración celular, como se demuestra por su necesidad para una quimiotaxis eficiente (PubMed:17229814). Referencias relacionadas: PMID:17229814
• La proteína se localiza en lamelipodios y pliegues de la membrana, estructuras dinámicas en el borde delantero de las células migratorias, lo que subraya su papel en la regulación del citoesqueleto.
• PLCG1 contiene dominios SH2 y SH3 que median las interacciones con residuos de tirosina fosforilados en receptores activados, y ella misma se fosforila en residuos de tirosina clave (incluyendo Y783) para su activación completa.
• Está sujeta a diversas modificaciones postraduccionales, incluyendo fosforilación y acetilación, y se clasifica como una fosfoproteína, hidrolasa y transductor.

Guía experimental y consejos técnicos

• Este anticuerpo se genera contra un péptido fosforilado; por lo tanto, reconoce específicamente PLCG1 fosforilada en Y783. Para controles negativos, trate las muestras con lambda fosfatasa o use competencia con péptido no fosforilado para confirmar la especificidad.
• En Western blot, el peso molecular predicho de PLCG1 es de ~149 kDa. Asegure una separación adecuada de proteínas de alto peso molecular utilizando un porcentaje de gel apropiado (p. ej., 6-8% SDS-PAGE) y condiciones de transferencia.
• Para ELISA, el anticuerpo puede usarse como anticuerpo de detección en un formato de ELISA sándwich específico para fosforilación. Valide en el sistema de muestra relevante, como lisados celulares estimulados vs. no estimulados.
• Al detectar la fosforilación endógena de PLCG1, considere estimular las células con factores de crecimiento (p. ej., EGF, PDGF) que se sabe activan receptores de tirosina cinasa que fosforilan PLCG1 en Y783.
• Se indica reactividad cruzada con ratón; sin embargo, confirme la reactividad en su modelo experimental específico y valide el anticuerpo para otras especies si es necesario.
• Dado que el anticuerpo es un policlonal de conejo, puede ocurrir variabilidad entre lotes; incluya los controles apropiados y titule para obtener la concentración óptima.

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