Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-Fosfo-PLN-S16/T17 para WB, ELISA - P26678

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Fosfolambana

• La fosfolambana (PLN) es un regulador clave de la contractilidad del músculo cardíaco, codificada por el gen PLN, con un peso molecular de aproximadamente 6 kDa (UniProt: P26678).
• Inhibe reversiblemente la Ca2+-ATPasa 2 del sarco/retículo endoplásmico (SERCA2/ATP2A2) en el retículo sarcoplásmico cardíaco, reduciendo la afinidad aparente por el Ca2+ de la bomba, particularmente durante la diástole. Referencias relacionadas: PMID:28890335
• La fosforilación de PLN en Ser16 y Thr17 alivia la inhibición de SERCA2, promoviendo la recaptación de Ca2+ en el retículo sarcoplásmico y acelerando la relajación muscular.
• Subcelularmente, la PLN se localiza en el retículo endoplásmico, el retículo sarcoplásmico y las membranas mitocondriales, lo que es consistente con sus funciones en el manejo intracelular del Ca2+.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen fosforilación (en Ser16/Thr17), acetilación y palmitoilación, que modulan su actividad y asociación a la membrana.
• La PLN se expresa predominantemente en el músculo cardíaco, pero también desempeña funciones en espermátidas elongadas y en el núcleo reticular talámico del cerebro, influyendo en la diferenciación de células germinales y en los patrones de sueño, respectivamente.
• Las mutaciones en PLN se asocian con miocardiopatías (CMD1P, CMH18), lo que subraya su papel crítico en la función cardíaca.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Dado que el inmunógeno es un péptido fosfo-sintético que abarca la Ser16 y Thr17, se espera que el anticuerpo reconozca específicamente la forma dual-fosforilada de la PLN; valide la especificidad utilizando controles desfosforilados o tratamiento con fosfatasa en sistemas de muestra relevantes.
• Para el análisis por Western blot, utilice marcadores de bajo peso molecular y considere geles de Tris-Tricina al 15-20% para resolver la banda de PLN de 6 kDa; incluya inhibidores de fosfatasas durante la preparación de la muestra para preservar la fosforilación.
• Para ELISA, el recubrimiento con conjugados de fosfo-péptidos y el uso de péptidos competitivos o bloqueadores pueden ayudar a confirmar la especificidad para la forma fosforilada.
• Optimice la dilución del anticuerpo empíricamente para cada aplicación; se recomienda incluir controles positivos y negativos apropiados para confirmar la reactividad dependiente de la fosforilación.

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