Anticuerpo monoclonal de conejo anti-Fosfo-POLR2A CTD-S2 - P24928

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de POLR2A

• POLR2A codifica la subunidad más grande de la ARN polimerasa II, que cataliza la transcripción de precursores de ARNm y muchos ARN no codificantes.
• Forma el centro activo con POLR2B, coordinando iones Mg2+ para la adición de nucleótidos y la corrección de pruebas mediante actividad exonucleasa 3'->5'. Referencias relacionadas: PMID:30190596 PMID:8381534
• Contiene un dominio C-terminal (CTD) único con 52 repeticiones del heptapéptido (YSPTSPS) que sirve como plataforma para factores que regulan la iniciación, elongación y terminación de la transcripción.
• La fosforilación de la CTD en Ser5 promueve el escape del promotor, mientras que la fosforilación de Ser2 es necesaria para la liberación de la pausa y el procesamiento del pre-ARNm. Referencias relacionadas: PMID:26124092
• La acetilación y metilación de las lisinas de la CTD regulan la expresión génica, teniendo la metilación un efecto represor.
• Exhibe actividad de ARN polimerasa dependiente de ARN, extendiendo ARN no codificantes en el extremo 3'.
• La localización subcelular incluye núcleo, citoplasma y cromosoma.
• Palabras clave relevantes: fosfoproteína, acetilación, metilación, ADN polimerasa dirigida por ARN, transcripción, hidrolasa.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Este anticuerpo fosfo-específico reconoce POLR2A solo cuando la Ser2 en la repetición de la CTD está fosforilada. Incluya inhibidores de fosfatasas en los tampones de lisis y lavado para preservar la señal de fosforilación.
• Para inmunoprecipitación de cromatina (ChIP) y CUT&Tag, considere titular el anticuerpo y optimizar las condiciones de entrecruzamiento/sonicación para sus loci diana específicos.
• El anticuerpo es adecuado para Western blot (217 kDa), inmunofluorescencia e inmunohistoquímica; valídelo en el sistema de muestra relevante utilizando controles positivos y negativos apropiados (por ejemplo, células no tratadas frente a células tratadas con inhibidor de quinasa).
• Debido al alto peso molecular, utilice un gel de SDS-PAGE de bajo porcentaje o tiempos de transferencia prolongados para WB.

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