mAb de conejo anti-Fosfo-POLR2A CTD-S5 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P24928

Especificaciones y parámetros principales del producto

Información biológica: Función y localización de POLR2A (RPB1)

• POLR2A codifica la subunidad RPB1 de la ARN polimerasa II dirigida por ADN, la subunidad catalítica más grande de la Pol II, también conocida como RPB1, hRPB220 y POLR2 (UniProt P24928).
• Como componente catalítico central de la Pol II, RPB1 sintetiza precursores de ARNm y ARN no codificantes durante el ciclo de transcripción: iniciación, elongación y terminación. Referencias relacionadas: PMID:23748380 PMID:27193682 PMID:30190596 PMID:28108474
• El dominio C-terminal (CTD) consiste en 52 repeticiones de heptapéptidos y sufre fosforilación dinámica: la fosforilación de Ser5 promueve la escape del promotor, mientras que la fosforilación de Ser2 permite la liberación de la pausa y la elongación. Referencias relacionadas: PMID:24207025 PMID:26124092
• RPB1 se localiza predominantemente en el núcleo, y también está presente en el citoplasma y en los cromosomas durante la transcripción.
• Las modificaciones postraduccionales del CTD incluyen acetilación, metilación y ubiquitinación, que modulan la iniciación y elongación de la transcripción, especialmente de genes inducidos por factores de crecimiento.
• RPB1 también posee actividad de ARN polimerasa dependiente de ARN, implicada en la extensión de ARN no codificantes y las interacciones huésped-virus, como la replicación del virus delta de la hepatitis.
• Las mutaciones en POLR2A están asociadas a trastornos del neurodesarrollo y discapacidad intelectual (palabra clave de UniProt: Discapacidad intelectual, variante de enfermedad).

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un fosfopéptido sintético correspondiente a los residuos alrededor de Ser5 del CTD de POLR2A, lo que garantiza la especificidad por la forma fosforilada. Valide la especificidad del anticuerpo mediante tratamiento con fosfatasa o bloqueo con péptido no fosforilado en su sistema de ensayo.
• Para Western blot, espere una banda de ~217 kDa; considere utilizar un porcentaje de gel adecuado y condiciones de transferencia apropiadas para proteínas de alto peso molecular.
• El anticuerpo está validado para IHC-P y IF/ICC; optimice las condiciones de recuperación de antígeno y permeabilización según el tipo de tejido o célula.
• La reactividad cruzada con ratón y rata sugiere que las secuencias están conservadas en estas especies; confirme la idoneidad en su modelo experimental.

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