pAb de conejo contra PRKCQ fosforilado (S676) - Q04759

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de PRKCQ

• PRKCQ (Proteína quinasa C tipo theta), también conocida como nPKC-theta, es una serina/treonina-proteína quinasa independiente del calcio, dependiente de fosfolípidos y diacilglicerol, codificada por el gen PRKCQ. Desempeña funciones no redundantes en la señalización del receptor de linfocitos T (TCR), esencial para la activación, proliferación, diferenciación y supervivencia de los linfocitos T. Referencias relacionadas: PMID:21964608
• En linfocitos T coestimulados por TCR-CD3/CD28, PRKCQ es necesaria para la activación de NF-kappa-B y JUN, lo que conduce a la producción de IL2, y participa en la transactivación dependiente de calcio de NFATC1 y NFATC2. Referencias relacionadas: PMID:21964608
• PRKCQ fosforila directamente a CARD11 en residuos de serina, promoviendo la asociación de CARD11 con las balsas lipídicas y el reclutamiento del complejo BCL10-MALT1 para activar la vía canónica de NF-kappa-B. También fosforila a STK39/SPAK para mediar la activación de JUN. Referencias relacionadas: PMID:21964608
• Más allá de los linfocitos T, PRKCQ regula la transducción de señales en plaquetas downstream de los receptores ITGA2B, CD36/GP4, F2R/PAR1 y F2RL3/PAR4, desempeñando un papel positivo en la señalización "de adentro hacia afuera" y la secreción de gránulos. También puede inhibir la señalización de insulina al fosforilar a IRS1. Además, PRKCQ fosforila a MSN, PDPK1, CCDC88A/GIV y LRRK1, afectando diversos procesos celulares. Referencias relacionadas: PMID:23509302, PMID:36040231
• Su localización subcelular es predominantemente citoplásmica, con translocación dependiente de estímulo a la membrana celular, lo que concuerda con su papel en la transducción de señales desde los receptores de la superficie celular.
• Su expresión tisular es destacada en músculo esquelético, linfocitos T, células megacarioblásticas y plaquetas, alineándose con sus funciones clave en células inmunitarias y músculo.
• Este anticuerpo se obtuvo contra un fosfopéptido correspondiente a los residuos alrededor de la serina 676 de PRKCQ humano, lo que permite la detección específica de la forma fosforilada de la proteína. La serina 676 es un sitio de fosforilación crítico involucrado en la activación de PRKCQ y la señalización downstream.
• Las modificaciones postraduccionales de PRKCQ incluyen fosforilación, ubiquitinación y formación de enlaces isopépticos, como se indica en las palabras clave: Fosfoproteína, Enlace isopéptido y Conjugación Ubl. La proteína también presenta dominios de dedo de zinc, unión a ATP y actividad quinasa.

Guía experimental y consejos técnicos

• Para aplicaciones de Western blot, incluya inhibidores de fosfatasa en los tampones de lisis para preservar el estado de fosforilación de PRKCQ en Ser-676.
• La naturaleza fosfoespecífica del anticuerpo requiere una validación cuidadosa; considere usar un control de bloqueo con péptido no fosforilado o tratamiento con fosfatasa para confirmar la especificidad.
• En ELISA, el recubrimiento con péptidos fosforilados versus no fosforilados puede ayudar a evaluar la selectividad del anticuerpo.
• Como se trata de un anticuerpo policlonal de conejo, la detección requiere un conjugado secundario de IgG anti-conejo; optimice empíricamente las diluciones de los anticuerpos primario y secundario para cada ensayo.
• Dado el peso molecular de 82 kDa de PRKCQ, elija porcentajes de gel y condiciones de transferencia adecuados para garantizar una resolución y detección eficientes.

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