pAb de conejo Phospho-Rac1/2/3-S71 para WB, ELISA - P63000/P15153/P60763

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de Rac1/2/3

• Rac1 es una GTPasa pequeña asociada a la membrana plasmática que cicla entre un estado activo unido a GTP y un estado inactivo unido a GDP, regulando así diversos procesos celulares que incluyen el tráfico secretor, la fagocitosis de células apoptóticas, la polarización de células epiteliales y la formación de pliegues de membrana inducida por factores de crecimiento.
  Referencias relacionadas: PMID:1643658 | PMID:22843693 | PMID:23512198
• Estimula la actividad de la quinasa PKN2, contribuyendo a las cascadas de señalización descendentes.
  Referencias relacionadas: PMID:9121475
• Necesario para la translocación de DSG3 a las uniones intercelulares y la organización de haces de F-actina corticales, anclando el citoesqueleto de actina en las uniones celulares.
  Referencias relacionadas: PMID:22796473
• Actúa como subunidad del complejo NADPH oxidasa de fagocitos, mediando la transferencia de electrones desde NADPH citosólico al O2 para generar aniones superóxido.
  Referencias relacionadas: PMID:38355798
• En neuronas, participa en la morfogénesis de las espinas dendríticas y la formación de sinapsis, y regula la estabilidad sináptica del receptor GABA(A) a través de la estabilización de F-actina mediada por PAK1 (por similitud).
• La isoforma B posee un intercambio acelerado de GDP/GTP independiente de GEF y una hidrólisis de GTP alterada, una propiedad parcialmente restaurada por las proteínas activadoras de GTPasas; se expresa predominantemente en la piel y el epitelio intestinal y está sobreexpresada en tumores colorrectales.
  Referencias relacionadas: PMID:14625275
• Se localiza en la membrana celular, melanosomas, citoplasma, lamélipodios, dendritas, sinapsis, núcleo y pliegues de membrana, lo que refleja sus múltiples funciones en motilidad y señalización.
• Clasificado como fosfoproteína, proteína que une GTP y lipoproteína, y está sujeto a prenilación, palmitoilación y conjugación con ubiquitina.

Orientación experimental y consejos técnicos

• Debido a que este anticuerpo reconoce la fosforilación en Ser71, incluya inhibidores de fosfatasas (por ejemplo, ortovanadato de sodio, NaF) en los tampones de lisis para preservar el epítopo fosforilado.
• Verifique la detección dependiente de fosforilación tratando las muestras con lambda fosfatasa o realizando una competencia peptídica con la contraparte no fosforilada.
• Para transferencia Western, se espera una banda alrededor de 21 kDa; optimice las condiciones de bloqueo (por ejemplo, 5% de BSA en TBST) para minimizar la unión inespecífica.
• En ELISA, inmovilice el péptido fosforilado o recubra células/extractos directamente y utilice un control no fosforilado para evaluar la especificidad.

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