Anticuerpo monoclonal de conejo Phospho-Raptor-Ser792 para WB, ELISA - Q8N122

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la proteína asociada reguladora de mTOR

• RPTOR es un componente clave del objetivo mecanístico del complejo 1 de rapamicina (mTORC1), que actúa como sensor central de nutrientes que estimula las reacciones anabólicas y el crecimiento celular. Referencias relacionadas: PMID:12150925 PMID:12150926 PMID:12747827
• En respuesta a nutrientes y factores de crecimiento, mTORC1 se recluta hacia la membrana del lisosoma, donde RPTOR media este reclutamiento mediante interacción con GTPasas Rag. Referencias relacionadas: PMID:12747827 PMID:24403073 PMID:26588989
• RPTOR promueve la especificidad de sustrato al unirse a proteínas que contienen el motivo TOS y dirigirlas al dominio cinasa de MTOR para su fosforilación, incluidos los efectores descendentes clave RPS6KB1 y EIF4EBP1. Referencias relacionadas: PMID:12747827
• mTORC1 también inhibe las vías catabólicas al fosforilar los componentes de iniciación de la autofagia ULK1 y ATG13, así como el factor de transcripción TFEB. Referencias relacionadas: PMID:12150925 PMID:12150926 PMID:12747827
• La proteína se localiza en la membrana del lisosoma, el citoplasma y los gránulos citoplasmáticos, lo que coincide con su papel dinámico en la detección de nutrientes.
• RPTOR es una fosfoproteína (como se indica en su anotación de palabras clave), sujeta a modificaciones postraduccionales reguladoras; también se han observado acetilación y ubiquitinación.
• Se expresa altamente en el músculo esquelético, con menor expresión en cerebro, pulmón, intestino delgado, riñón y placenta; se expresa ampliamente en todos los tejidos, con niveles más altos en la mucosa nasal y la pituitaria.
• Los alias del gen incluyen KOG1 y Mip1; la proteína también se conoce como proteína andamio p150 del objetivo de rapamicina (TOR).

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético correspondiente al sitio Ser792 fosforilado; para WB, utilice líneas celulares humanas como HeLa o HEK293 que se sabe que expresan RPTOR.
• Valide la fosforo-especificidad tratando los lisados celulares con fosfatasa lambda para confirmar la pérdida de señal, o utilizando competición por péptido no fosforilado en ELISA.
• Para ELISA, considere recubrir con el péptido fosforilado y detectar con el anticuerpo; optimice la concentración de recubrimiento y las condiciones de bloqueo.
• RPTOR es una proteína grande (~149 kDa); asegure una transferencia de proteína adecuada y utilice un porcentaje de gel apropiado (por ejemplo, 6-8% de SDS-PAGE) para WB.

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