Anticuerpo monoclonal de conejo Phospho-RB-S795 para WB, IHC-P, ELISA - P06400

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la proteína asociada al retinoblastoma

• La proteína asociada al retinoblastoma (RB1, también conocida como pRb, p105-Rb, p110-RB1, pp110) es una proteína supresora tumoral codificada por el gen RB1 en los seres humanos.
• RB1 es un regulador clave de la transición G1/S del ciclo celular. En su estado hipofosforilado, se une e inhibe los factores de transcripción E2F, reprimiendo la transcripción de los genes necesarios para la entrada a la fase S. Referencias relacionadas: PMID:10499802
• La fosforilación de RB1 mediada por cinasas dependientes de ciclina (CDK) altera su interacción con las E2F, liberando la represión transcripcional y permitiendo la progresión del ciclo celular. Referencias relacionadas: PMID:10499802
• RB1 también promueve la transición G0-G1 a través de su fosforilación por CDK3/ciclina C, lo que resalta aún más su papel regulador en la entrada y salida del ciclo celular. Referencias relacionadas: PMID:15084261
• Subcelularmente, RB1 se encuentra predominantemente en el núcleo, aunque también puede detectarse en el citoplasma, lo que concuerda con sus funciones en la regulación de la transcripción y la organización de la cromatina.
• RB1 participa en la formación de heterocromatina y el silenciamiento epigenético al reclutar metiltransferasas de histonas (por ejemplo, SUV39H1, KMT5B, KMT5C) y desacetilasas de histonas, manteniendo así la estructura de la cromatina.
• Su expresión tisular incluye la retina y los queratinocitos del prepucio, donde se ha detectado la proteína RB1.
• Además, RB1 es un objetivo de oncoproteínas virales como el antígeno T grande de SV40, la E7 del VPH y la E1A del adenovirus, que desestabilizan los complejos RB1-E2F para promover la replicación viral.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un fosfopéptido sintético correspondiente a los residuos alrededor de Ser795 del RB humano. Al evaluar la especificidad, se recomienda comparar las señales con las obtenidas con un anticuerpo RB no fosfoespecífico o con muestras tratadas con fosfatasa.
• Para Western blot, RB1 es una proteína de gran tamaño (aproximadamente 106 kDa); asegúrese de usar condiciones de transferencia adecuadas y marcadores preteñidos para confirmar el peso molecular.
• En inmunohistoquímica (IHC-P), los pasos de recuperación de antígeno y bloqueo pueden influir en la tinción; optimice estos parámetros para su sistema tisular específico.
• Este anticuerpo presenta reactividad cruzada con la RB1 de ratón y rata, por lo que puede usarse en estudios con líneas celulares o tejidos de roedores; no obstante, valide los niveles de expresión y el estado de fosforilación en su modelo experimental.
• Dada su aplicación en ELISA, asegúrese de que el epítopo fosforilado se conserve en el tampón de recubrimiento y que los agentes de bloqueo no interfieran con la unión fosfoespecífica.

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