Fosfo-RB-S811 pAb de conejo para WB, ELISA - P06400

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de RB

• RB es una proteína supresora de tumores que regula críticamente la transición G1/S del ciclo celular controlando la transcripción dependiente de E2F. Referencias relacionadas: PMID:10499802
• En su forma hipofosforilada, RB se une a factores de transcripción E2F, bloqueando físicamente su dominio de transactivación y reclutando enzimas modificadoras de cromatina para reprimir la transcripción génica. Referencias relacionadas: PMID:10499802
• La fosforilación de RB mediada por Ciclina/CDK induce su disociación de los E2F, permitiendo la transcripción de genes de fase S y la progresión del ciclo celular; la fosforilación por CDK3/ciclina-C promueve específicamente la transición G0-G1. Referencias relacionadas: PMID:10499802 PMID:15084261
• RB también contribuye a la formación de heterocromatina estabilizando la metilación de histonas y reclutando metiltransferasas de histonas como SUV39H1, manteniendo así la estructura de la heterocromatina constitutiva.
• Subcelularmente, RB se localiza principalmente en el núcleo, pero también puede detectarse en el citoplasma.
• Las modificaciones postraduccionales, que incluyen fosforilación, acetilación y metilación, regulan la actividad de RB; las oncoproteínas virales (p. ej., antígeno T grande de SV40, HPV E7) pueden interrumpir los complejos RB-E2F, destacando su papel en las interacciones huésped-virus.
• La expresión tisular incluye la retina y los queratinocitos del prepucio (a nivel de proteína). Referencias relacionadas: PMID:20940255

Guía experimental y consejos técnicos

• Para el análisis de Western blot, incluya inhibidores de fosfatasas en los tampones de lisis para preservar la fosforilación de RB en Ser811.
• Valide la especificidad del anticuerpo mediante ensayo de competencia con péptidos utilizando el péptido inmunógeno fosforilado o mediante tratamiento con fosfatasa de lisados celulares.
• Seleccione líneas celulares o muestras de tejido con fosforilación conocida de RB en Ser811 (p. ej., líneas celulares de cáncer en ciclo) como controles positivos.
• Para aplicaciones de ELISA, titule el anticuerpo para determinar las condiciones óptimas de recubrimiento y detección, realizando ensayos de curva estándar con péptido fosfo y controles no fosfo para confirmar la especificidad.

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