Fosfo-RPA2-S4/S8 pAb de conejo - P15927

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la subunidad de 32 kDa de la proteína A de replicación

• La subunidad de 32 kDa de la proteína A de replicación (RPA2, también conocida como RPA32, RP-A p32, RP-A p34) es un componente del complejo heterotrimérico de proteína A de replicación (RPA), que incluye RPA1, RPA2 y RPA3.
• RPA se une y estabiliza los intermedios de ADN de cadena simple (ssDNA) generados durante la replicación del ADN y el estrés del ADN, evitando la rehibridación y facilitando el reclutamiento de proteínas del metabolismo del ADN.
• En la respuesta celular al daño del ADN, RPA es crucial para la reparación del ADN y la activación de puntos de control. Recluta el complejo quinasa ATR-ATRIP a los sitios de daño del ADN, iniciando la cascada de respuesta al daño del ADN.
• RPA recluta factores de reparación clave a la cromatina, incluyendo RAD51 y RAD52 para la reparación de roturas de doble cadena, así como XPA y XPG para la reparación por escisión de nucleótidos (NER). También participa en la reparación por escisión de bases (BER) a través de la interacción con UNG.
• RPA estimula la actividad de helicasa 5'-3' de BRIP1/FANCJ, que está involucrada en la reparación de entrecruzamientos de hebras.
  Referencias relacionadas:
  PMID:17596542
• RPA se localiza principalmente en el núcleo y se encuentra en los cuerpos PML, lo cual es consistente con sus funciones en el metabolismo del ADN.
• RPA2 es una fosfoproteína sujeta a diversas modificaciones postraduccionales, incluyendo acetilación, ubiquitinación y splicing alternativo, que regulan su función en la señalización de daño del ADN.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético fosforilado alrededor de S4 y S8 de RPA2 humana. Para la confirmación por Western blot, considere usar lisados celulares tratados con fosfatasa para verificar la pérdida de la señal específica de fosforilación.
• El peso molecular predicho de RPA2 no modificada es de 29 kDa; sin embargo, la fosforilación u otras modificaciones pueden afectar la migración. Use marcadores de peso molecular apropiados y valide en su sistema de muestras.
• Se recomienda este anticuerpo para WB y ELISA. Para ELISA, titre el anticuerpo para determinar la dilución de trabajo óptima e incluya un control de péptido no fosforilado para asegurar la especificidad.
• Se ha informado reactividad cruzada con RPA2 de rata; si usa muestras de rata, valide el rendimiento bajo sus condiciones experimentales.

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