Fosfo-Rpb1 CTD-S2/S5 mAb de conejo - P24928

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la subunidad RPB1 de la ARN polimerasa II dirigida por ADN

• La subunidad RPB1 de la ARN polimerasa II dirigida por ADN (también conocida como POLR2A) es el componente más grande y el núcleo catalítico de la ARN polimerasa II, responsable de sintetizar precursores de ARNm y muchos ARN no codificantes funcionales. Referencias relacionadas: PMID:23748380 PMID:27193682 PMID:30190596
• El ciclo de transcripción de Pol II incluye la iniciación, la elongación y la terminación. Durante la iniciación, el complejo de preiniciación se ensambla en los promotores; la elongación implica la síntesis procesiva de ARN; la terminación libera la transcripción. Referencias relacionadas: PMID:23748380 PMID:27193682 PMID:28108474
• La enzima cataliza la adición de nucleótidos a través de un mecanismo de dos iones metálicos, con POLR2A contribuyendo con un motivo DxDGD de coordinación de Mg²⁺ y POLR2B proporcionando coordinación adicional. Referencias relacionadas: PMID:30190596 PMID:8381534 PMID:9852112
• Posee actividad de corrección de pruebas de exonucleasa 3'→5', lo que permite la eliminación de nucleótidos incorporeados incorrectamente. Referencias relacionadas: PMID:8381534
• El dominio C-terminal único (CTD) consta de 52 repeticiones de heptapéptidos (YSPTSPS) y sufre fosforilación dinámica, principalmente en Ser2 y Ser5, lo que regula la salida del promotor, la elongación y el procesamiento del ARNm. Referencias relacionadas: PMID:24207025 PMID:26124092
• La acetilación y metilación de lisinas del CTD equilibran la expresión génica; la acetilación promueve la transcripción de genes inducidos por factores de crecimiento y la metilación generalmente reprime la expresión. Referencias relacionadas: PMID:24207025 PMID:26124092
• Además, RPB1 puede funcionar como una ARN polimerasa dependiente de ARN, extendiendo ARN no codificantes, y actúa en la replicación del virus de la hepatitis delta.
• Localización subcelular: predominantemente nuclear, pero también se encuentra en el citoplasma y asociada con los cromosomas.

Guía experimental y consejos técnicos

• Al realizar Western blot, asegúrese de que los tampones de lisis contengan inhibidores de fosfatasas para preservar la fosforilación del CTD. Incluya un control tratado con fosfatasa para confirmar la especificidad de fosfo.
• Para la inmunoprecipitación de cromatina (ChIP) y CUT&Tag, este anticuerpo puede ayudar a perfilar la ocupación de la ARN polimerasa II y los patrones de fosforilación de Ser2/Ser5 en todo el genoma.
• En ELISA, el anticuerpo se puede utilizar para cuantificar los niveles de fosfo-POLR2A en lisados o muestras purificadas.

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