mAb de conejo Phospho-Rpb1 CTD-T4 para WB, ELISA - P24928

Especificaciones y parámetros principales del producto

Información biológica: Función y localización de la subunidad RPB1 de la ARN polimerasa II dirigida por ADN

• La subunidad RPB1 de la ARN polimerasa II dirigida por ADN es el núcleo catalítico de la Pol II, responsable de sintetizar precursores de ARNm y ARN no codificantes en un ciclo de transcripción que incluye iniciación, elongación y terminación. Referencias relacionadas: PMID:23748380, PMID:27193682, PMID:30190596, PMID:28108474
• RPB1 forma el centro activo junto con la subunidad RPB2, cataliza la adición de nucleótidos mediante un motivo DxDGD coordinado por Mg²⁺ y corrige nucleótidos mal incorporados a través de actividad exonucleasa 3′→5′. Referencias relacionadas: PMID:8381534, PMID:9852112, PMID:30190596
• El dominio C-terminal (CTD) único de RPB1, compuesto por 52 repeticiones de heptapéptidos, funciona como una plataforma dinámica para procesos acoplados a la transcripción; la fosforilación en Ser5 promueve la salida del promotor, mientras que la fosforilación en Ser2 es fundamental para la elongación y el procesamiento del pre-ARNm. La acetilación y metilación de lisinas del CTD ajustan con mayor precisión la expresión génica. Referencias relacionadas: PMID:24207025, PMID:26124092
• Más allá de la transcripción dependiente de ADN, RPB1 posee actividad de ARN polimerasa dependiente de ARN que extiende ARN no codificantes y puede actuar como replicasa/transcriptasa para el virus de la hepatitis delta.
• RPB1 se localiza principalmente en el núcleo y en los cromosomas, aunque también puede encontrarse en el citoplasma.
• Las modificaciones postraduccionales de RPB1 incluyen fosforilación, acetilación, metilación, ubiquitinación e ISGilación, que regulan su actividad e interacciones.
• Las mutaciones en POLR2A se asocian a trastornos del neurodesarrollo, incluida la discapacidad intelectual (NEDHIB).

Guía experimental y consejos técnicos

• Al realizar la transferencia Western (Western blotting), incluye inhibidores de fosfatasas en los tampones de lisis para preservar la fosforilación de T4, y utiliza un gel de resolución de gradiente o de alto porcentaje para separar claramente la banda de 217 kDa.
• Para ELISA, considera la adsorción (coating) con un péptido fosforilado o extractos proteicos enriquecidos en fosfoproteínas para confirmar la especificidad por el epítopo modificado.
• La reacción cruzada del anticuerpo con humano, ratón y rata sugiere un motivo T4 conservado; valida el reactivo en la especie y el tipo de muestra correspondiente a tu sistema experimental.

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