Phospho-SHC1-Y427 Rabbit pAb - P29353

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de SHC1

• SHC1 codifica tres isoformas principales—p46Shc, p52Shc y p66Shc—generadas por splicing alternativo y uso de promotores alternativos.
• Las isoformas p46Shc y p52Shc acoplan los receptores tirosina quinasa activados a la vía de señalización Ras mediante el reclutamiento del complejo GRB2/SOS, propagando así señales mitogénicas.
• La isoforma p66Shc no participa en la activación de Ras, sino que media las respuestas al estrés oxidativo y la apoptosis; actúa corriente abajo de p53 para aumentar los oxidantes intracelulares y la liberación de citocromo c.
• SHC1 participa en la señalización del receptor de angiopoyetina TEK/TIE2, regulando la migración de las células endoteliales y la angiogénesis de brote.
• Participa en la señalización mediada por oncostatina-M a través del receptor de OSM de tipo II, contribuyendo a la activación de la vía Ras/Raf/MAPK mediante el reclutamiento dependiente de JAK1 a la subunidad OSMR y la asociación de SHC1 con GRB2. Referencias relacionadas: PMID:11016927
• SHC1 se localiza en el citoplasma, las adhesiones focales y la matriz mitocondrial, reflejando sus diversos roles de señalización.
• La proteína se expresa ampliamente, notablemente en células madre neurales, pero está ausente en neuronas maduras.
• Las modificaciones postraduccionales clave incluyen la fosforilación (es una fosfoproteína) y la acetilación; contiene un dominio SH2 esencial para las interacciones proteína-proteína.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético fosforilado alrededor de Y427, lo que permite la detección específica de la fosforilación en este residuo. Para el Western blot, considere el uso de controles de proteína total y específicos de fosfo para confirmar la identidad de la banda.
• Valide el rendimiento del anticuerpo en líneas celulares humanas o de ratón relevantes estimuladas con factores de crecimiento apropiados (p. ej., EGF, PDGF) para inducir la fosforilación de SHC1.
• Para ELISA, confirme la especificidad mediante inhibición competitiva con el péptido fosforilado frente al no fosforilado.
• Optimice la dilución del anticuerpo primario y las condiciones de bloqueo; una dilución inicial típica para WB podría ser de 1:500–1:2000, pero se recomienda la determinación empírica en su sistema.
• Dado que SHC1 participa en múltiples cascadas de señalización, interprete los resultados en el contexto de la vía completa y los posibles mecanismos de retroalimentación.

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