Phospho-Smad2 (S245/S250/S255) Rabbit mAb para WB y ELISA - Q15796

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de SMAD2

• SMAD2 (homólogo de mothers against decapentaplegic 2) es un SMAD regulado por receptor (R-SMAD) que funciona como un transductor de señal intracelular y modulador transcripcional para las quinasas de receptor tipo 1 de TGF-beta (factor de crecimiento transformante) y activina.
• Tras la fosforilación en su motivo C-terminal SXS (residuos de serina 465 y 467), SMAD2 forma un complejo con SMAD4 y se transloca al núcleo, donde se une al elemento sensible a TGF-beta (TRE) en los promotores de genes diana para regular la transcripción.
• SMAD2 regula positivamente la actividad de la quinasa PDPK1 al estimular su disociación de la proteína inhibidora 14-3-3 YWHAQ.
• Se ha implicado como un supresor tumoral en el carcinoma colorrectal. Referencias relacionadas: PMID:8752209
• A nivel subcelular, SMAD2 se desplaza entre el citoplasma y el núcleo, lo cual es consistente con su función en la transducción de señales.
• La proteína se expresa a niveles altos en el músculo esquelético, las células endoteliales, el corazón y la placenta.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la fosforilación, la acetilación y la ubiquitinación, que regulan su actividad, estabilidad e interacciones.
• El splicing alternativo genera múltiples isoformas, y la proteína contiene un dominio de unión a iones de zinc (dominio MH1) que media la unión al ADN.

Guía experimental y consejos técnicos

• Este anticuerpo se generó contra un péptido fosforilado; los tampones de lisis de muestras deben incluir inhibidores de fosfatasas (p. ej., ortovanadato de sodio, fluoruro de sodio) para mantener el estado de fosforilación durante la preparación.
• Para Western blot, considere ejecutar lisados celulares tanto sin tratar como estimulados con TGF-β/activina para confirmar los cambios de banda dependientes de la activación.
• Se recomienda una dilución inicial para WB de 1:500–1:2000, pero la concentración óptima debe determinarse empíricamente en su sistema de muestra específico.
• En ELISA, el uso de un tampón de bloqueo con baja actividad de fosfatasa puede reducir el ruido de fondo; considere un ensayo competitivo con péptido fosforilado para verificar la especificidad.
• Como anticuerpo monoclonal de conejo, utilice un anticuerpo secundario anti-IgG de conejo (H+L) conjugado con HRP o AP para la detección.

CamelBio: Su puente de abastecimiento integral

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