Anticuerpo policlonal de conejo Phospho-Smad2-S465/S467 para WB, ELISA - Q15796

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de Smad2

• Smad2, también conocido como MADH2, MADR2 o JV18-1, es un miembro de la familia de SMAD reguladas por receptor (R-SMAD), actuando como un transductor de señal intracelular aguas abajo de los receptores de TGF-beta y activina.
• Tras la fosforilación en S465 y S467 por las quinasas del receptor tipo 1, Smad2 forma un complejo con Smad4, se transloca al núcleo y se une al elemento TRE para regular la transcripción de genes sensibles a TGF-beta.
• Smad2 promueve la transcripción mediada por TGFB1 de genes de diferenciación odontoblástica en células de la papila dental y regula positivamente la actividad quinasa de PDPK1 al disociarla de YWHAQ (proteína 14-3-3).
• Puede funcionar como un supresor de tumores en el carcinoma colorrectal (PubMed:8752209). Referencias relacionadas: PMID:8752209
• La localización subcelular es principalmente citoplasmática en condiciones basales, pero se desplaza al núcleo tras la activación, consistente con su papel en la transducción de señales.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen fosforilación (crítica para la activación), acetilación y ubiquitinación (conjugación Ubl). La proteína contiene un dominio de unión a zinc y sufre empalme alternativo.
• Smad2 se expresa altamente en músculo esquelético, células endoteliales, corazón y placenta, reflejando su amplio papel en el desarrollo y la homeostasis tisular.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido fosforilado sintético que abarca S465 y S467 de Smad2 humano; por lo tanto, es probable que el anticuerpo reconozca la forma doblemente fosforilada (activa). Para preservar la fosforilación del epítopo, añada inhibidores de fosfatasas durante la preparación de la muestra.
• Para Western blot (WB), utilice SDS-PAGE reductor y transferencia a PVDF; considere optimizar el bloqueo y la dilución del anticuerpo usando lisados celulares relevantes tratados con TGF-beta1 o un control con inhibidor de fosfatasas.
• Para ELISA, utilice un sistema de detección fosfo-específico y valide con ensayos de competición con péptido para confirmar la especificidad.
• Valide la reactividad cruzada con muestras de ratón, ya que se predice reactividad; realice una alineación específica de especie del epítopo si es necesario para otras especies.

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