Anticuerpo monoclonal de conejo para Fosfo-Smad2-S465/S467 + Smad3-S423/S425 para WB, ELISA - Q15796/P84022

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de SMAD2

• SMAD2 (Homólogo 2 de Madres contra decapentaplegia), también conocido como MADH2 o MADR2, es una SMAD regulada por receptor (R-SMAD) que sirve como transductor de señal intracelular para las quinasas del receptor tipo 1 de TGF-beta y activina.
• Tras la unión del ligando, SMAD2 se fosforila en los residuos de serina del extremo C-terminal S465/S467, lo que lleva a la formación de un complejo con SMAD4 y su translocación al núcleo, donde se une a elementos TRE para regular la transcripción génica.
• Modula positivamente la actividad de la quinasa PDPK1 al promover su disociación de la proteína 14-3-3 YWHAQ, un regulador negativo clave.
• SMAD2 puede funcionar como un supresor de tumores en el carcinoma colorrectal. Referencias relacionadas: PMID:8752209
• Subcelularmente, SMAD2 se localiza tanto en el citoplasma como en el núcleo, con un transporte dinámico controlado por su estado de fosforilación.
• La expresión tisular es prominente en músculo esquelético, células endoteliales, corazón y placenta.
• Modificaciones postraduccionales como fosforilación, acetilación y ubiquitinación ajustan finamente la actividad y estabilidad de SMAD2.
• Este anticuerpo detecta la doble fosforilación en S465/S467 de SMAD2 y los sitios homólogos S423/S425 de SMAD3, ambos críticos para la activación en la transducción de señales de TGF-beta.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El anticuerpo monoclonal de conejo se generó contra un fosfopéptido sintético que rodea S465/S467 de SMAD2 humano, lo que garantiza especificidad para el estado fosforilado activado.
• Para Western blot, incluya inhibidores de fosfatasas en los tampones de lisis para preservar la fosforilación del objetivo. Bandas principales esperadas: ~52 kDa (SMAD2) y ~48 kDa (SMAD3); bandas adicionales a ~25, 35 y 43 kDa pueden representar productos de escisión o isoformas. Verifique la especificidad con controles tratados con fosfatasa o silenciamiento con siRNA.
• Para ELISA, considere normalizar la señal de fosforilación con respecto a los niveles totales de SMAD2/3 utilizando un anticuerpo pan; optimice las condiciones experimentales empíricamente.
• Se ha observado reactividad cruzada con proteínas humanas, de ratón y de rata; confirme los niveles endógenos de fosforilación en su sistema experimental con la estimulación apropiada de TGF-beta.

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