Anticuerpo monoclonal de conejo Fosfo-STAT1-Y701 para WB y ELISA - P42224

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de STAT1

• Transductor de señales y activador de la transcripción que media las respuestas celulares a interferones (IFNs), la citoquina KITLG/SCF y otras citoquinas y factores de crecimiento. Desempeña un papel central en las cascadas de señalización JAK-STAT. Referencias relacionadas: PMID:12764129, PMID:12855578, PMID:15322115
• Tras la estimulación con IFN tipo I (IFN-alfa/beta), STAT1 se fosforila en tirosina en Y701 por las quinasas JAK, se dimeriza con STAT2 e IRF9 para formar el complejo ISGF3, que se transloca al núcleo y se une a elementos ISRE para inducir genes estimulados por interferón (ISG) y establecer un estado antiviral. Referencias relacionadas: PMID:28753426, PMID:35568036
• En respuesta al IFN tipo II (IFN-gamma), STAT1 forma un homodímero (GAF) que se une a elementos GAS, impulsando la transcripción de genes diana. Los eventos de fosforilación en tirosina y serina son críticos para esta activación. Referencias relacionadas: PMID:8156998, PMID:26479788
• Activado por la señalización KITLG/SCF-KIT, expandiendo su papel más allá de los interferones. Referencias relacionadas: PMID:15526160
• Participa en la señalización mediada por FGFR, potencialmente a través de interacción directa o efectos aguas abajo. Referencias relacionadas: PMID:19088846
• Tras la endocitosis de TLR4, STAT1 se fosforila en Thr-749 por IKBKB, promoviendo la transcripción de ARID5A e IL12B, vinculando señales inmunes innatas con la expresión de genes inflamatorios. Referencias relacionadas: PMID:32209697
• Se desplaza entre el citoplasma y el núcleo; la importación nuclear está estrictamente regulada por el estado de fosforilación. Contiene el dominio SH2 conservado y el dominio de unión al ADN característico de los miembros de la familia STAT.
• También está implicado en la tolerancia inmune intestinal: se asocia con el fragmento p13 de Gasdermina-D para promover la transcripción de CIITA y la diferenciación de células Tr1 (por similitud).

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno utilizado es un péptido sintético fosforilado alrededor de Y701 del STAT1 humano; considere emplear competición con péptido no fosforilado o tratamiento con fosfatasa para confirmar la especificidad de la fosforilación en sus ensayos.
• Para western blot, STAT1 migra aproximadamente a 87 kDa. Utilice marcadores de peso molecular apropiados y valide las bandas en condiciones reductoras.
• En aplicaciones de ELISA, se pueden probar formatos de detección directa o indirecta; recubrir con péptido fosforilado y detectar con un anticuerpo secundario conjugado con HRP es un enfoque común.
• Dado que la activación de STAT1 depende del estímulo, trate las células con interferón (por ejemplo, IFN-alfa o IFN-gamma) para inducir la fosforilación en Y701 antes de la lisis para una detección robusta.
• La reactividad cruzada con humano, ratón y rata está documentada; para otras especies, alinee la secuencia diana alrededor de Y701 para evaluar la reactividad potencial.

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