mAb de conejo Phospho-STING/TMEM173-S365 para WB, ELISA - Q3TBT3

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de STING

• STING (estimulator de genes de interferón, también conocido como TMEM173/ERIS/MITA) es un facilitador de la señalización inmune innata que detecta el ADN citosólico de bacterias y virus y promueve la producción de interferones de tipo I (IFN-α e IFN-β). Referencias relacionadas: PMID:18818105, PMID:19433799, PMID:19776740
• Actúa uniéndose a dinucleótidos cíclicos, incluidos el di-GMP cíclico bacteriano (c-di-GMP) y el GMP-AMP cíclico endógeno (cGAMP) producido por cGAS después del reconocimiento del ADN citosólico. Referencias relacionadas: PMID:21947006, PMID:23258412, PMID:23519410
• Después de unirse al ligando, STING se oligomeriza, se transloca desde el retículo endoplásmico al Golgi y es fosforilado por TBK1 en el motivo pLxIS (que incluye el S365), lo que conduce al reclutamiento de IRF3 y la inducción de interferones. Referencias relacionadas: PMID:25636800, PMID:27324217, PMID:29973723
• STING también activa la autofagia: la unión de cGAMP induce su movimiento hacia el compartimento ERGIC y la formación de autofagosomas para degradar los patógenos de ADN citosólicos. La función de autofagia puede desacoplarse de la señalización de interferones. Referencias relacionadas: PMID:30568238
• STING se expresa de forma ubicua, pero está enriquecido en tejidos inmunitarios como el bazo y el timo, y en las células dendríticas.
• Subcelularmente, STING reside en la membrana del retículo endoplásmico; después de la activación, se desplaza por el ERGIC y el Golgi, y puede localizarse en autofagosomas, mitocondrias y la membrana celular.
• La fosforilación en la serina 365 (S365) dentro del motivo pLxIS es crítica para la activación de IRF3 mediada por STING y la producción de interferones. La forma fosforilada de S365 es un marcador de activación clave.
• Además, STING puede desempeñar funciones en la apoptosis a través de la asociación con MHC-II y en la propagación intercelular de la señalización antiviral. Referencias relacionadas: PMID:18559423

Guía experimental y consejos técnicos

• El anticuerpo se generó utilizando un inmunógeno de fosfopéptido sintético alrededor del S365; detecta específicamente la forma fosforilada de STING. Para Western blot, se recomienda utilizar inhibidores de fosfatasas durante la preparación de muestras para preservar el estado de fosforilación.
• Para validar la especificidad, trate los lisados celulares con fosfatasa o compare las señales entre condiciones estimuladas (por ejemplo, tratadas con cGAMP) y no estimuladas.
• Para ELISA, optimice los pasos de bloqueo y lavado para reducir la unión inespecífica, y realice una titulación del anticuerpo para determinar la concentración óptima.
• Este anticuerpo está validado para muestras de ratón; la reactividad cruzada con otras especies debe confirmarse experimentalmente si es necesario.

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