Fosfo-Syk-Y323 pAb de conejo para WB, IF/ICC - P43405

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la tirosina-proteína quinasa SYK

• La tirosina-proteína quinasa SYK (tirosina quinasa del bazo, p72-Syk) es una tirosina quinasa no receptora que media la transducción de señales aguas abajo de una variedad de receptores transmembrana, incluyendo inmunorreceptores clásicos como el receptor de células B (BCR). Referencias relacionadas: PMID:12456653, PMID:15388330, PMID:34634301
• A través de sus dos dominios SH2, SYK se ensambla en complejos de señalización con receptores activados en la membrana plasmática uniéndose a dominios ITAM fosforilados en tirosina, un proceso a menudo iniciado por quinasas de la familia SRC.
• En células B, SYK es esencial para la maduración en la transición de pro-B a pre-B y fosforila adaptadores clave como BLNK, así como PLCG1 y BTK, para propagar la señalización del BCR. Referencias relacionadas: PMID:12456653
• SYK desempeña un papel crucial en la inmunidad innata al mediar las respuestas a patógenos fúngicos, bacterianos y virales, por ejemplo a través de CLEC7A, lo que conduce a la producción de ROS y la activación del inflamasoma.
• Más allá de los inmunorreceptores, SYK funciona aguas abajo de los receptores de adhesión celular, transmitiendo la activación mediada por integrinas de neutrófilos y macrófagos, y participa en la activación plaquetaria por colágeno y podoplanina. Referencias relacionadas: PMID:12387777
• SYK regula diversos procesos biológicos incluyendo la maduración de osteoclastos, el desarrollo vascular y la respuesta inmune intestinal a través de la producción de citoquinas mediada por NF-κB. Referencias relacionadas: PMID:12387777, PMID:33782605
• A nivel subcelular, SYK se encuentra en la membrana celular y en el citoplasma/citosol. Se expresa ampliamente en células hematopoyéticas, particularmente en neutrófilos y a lo largo del desarrollo de células B.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la fosforilación (el sitio Y323 es crítico para la activación), y contiene dominios SH2 y un dominio de unión a ATP de la quinasa.

Guía experimental y consejos técnicos

• Este anticuerpo se generó contra un péptido específico de fosfoproteína que rodea la tirosina 323 de SYK humana. La secuencia del inmunógeno corresponde a un sitio de fosforilación conocido por regular la activación de SYK y la señalización aguas abajo.
• Para una detección óptima de SYK fosforilada, incluya inhibidores de fosfatasas en todos los tampones de lisis y ensayo para preservar el estado de fosforilación de la proteína objetivo.
• El producto se recomienda para WB e IF/ICC. En WB, se espera una banda cercana a 72 kDa. Para IF/ICC, los pasos de fijación y permeabilización deben optimizarse para las localizaciones de membrana y citosólicas del objetivo.
• Considere validar el anticuerpo en su sistema de muestra relevante bajo condiciones donde se induce la fosforilación de SYK (p. ej., estimulación con BCR) frente a controles no inducidos para confirmar la especificidad.

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