pAb de conejo contra TBC1D4 fosforilado (S588) para WB y ELISA - O60343

Especificaciones y parámetros principales del producto

Contexto biológico: Función y localización de TBC1D4

• TBC1D4, también conocida como AS160 (sustrato de Akt de 160 kDa), es una proteína multidominio que actúa como proteína activadora de GTPasas (GAP) para proteínas Rab, entre ellas RAB2A, RAB8A, RAB10 y RAB14.
• La isoforma 2 de TBC1D4 cumple un papel fundamental en la translocación de GLUT4 inducida por insulina hacia la membrana plasmática, lo que incrementa la captación de glucosa en adipocitos y células del músculo esquelético.
• TBC1D4 es una fosfoproteína con múltiples sitios de fosforilación; la fosforilación en Ser588 está asociada a la vía de señalización de insulina y regula su actividad GAP y su interacción con proteínas 14-3-3.
• La proteína se expresa de forma generalizada: la isoforma 1 se encuentra altamente expresada en músculo esquelético y corazón, mientras que la isoforma 2 es abundante en glándula suprarrenal, tiroides, pulmón, riñón, colon, cerebro y tejido adiposo.
• En los islotes pancreáticos, la expresión de TBC1D4 está disminuida en pacientes con diabetes tipo 2, lo que relaciona esta proteína con la fisiopatología de la diabetes mellitus.
• A nivel subcelular, TBC1D4 se localiza principalmente en el citoplasma, donde interactúa con vesículas y componentes de vías de señalización.
• Otras modificaciones postraduccionales incluyen la acetilación y metilación, que pueden modular aún más su función.

Guía experimental y consejos técnicos

• Para Western blot (WB), se recomienda utilizar lisados de células totales de células estimuladas con insulina frente a células no estimuladas para validar la detección dependiente de fosforilación; incluya inhibidores de fosfatasas durante la preparación de muestras.
• Debido al alto peso molecular de la proteína (~147 kDa), utilice un porcentaje de gel y condiciones de transferencia adecuados para garantizar una detección eficiente; verifique el tamaño de la banda con un marcador de peso molecular.
• En ELISA, el anticuerpo se puede utilizar para la detección de péptidos fosforilados; incluya controles de péptido no fosforilado para confirmar la especificidad.
• El anticuerpo presenta reactividad cruzada con TBC1D4 de humano, ratón y rata; realice la validación en la especie y contexto tisular correspondiente, teniendo en cuenta los perfiles de expresión tisular específica.
• Como se trata de un anticuerpo policlonal de conejo, la consistencia entre lotes puede variar; se recomienda realizar una nueva validación al cambiar a un lote diferente.

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